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廣州競遠生物科技有限公司
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| 細胞水平實驗（4） |
細胞克隆形成實驗
服務簡介
細胞克隆形成率即細胞接種存活率，表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
應用
如要觀察外源基因表達后較短時間內就能檢測的細胞功能，可使用瞬時轉染/感染。即在轉染后24至96小時內收獲細胞;如需要長期觀察外源基因表達的作用，進行長期藥理學研究、基因治療研究、遺傳調控機制研究或需要進行大規模蛋白合成則需要構建穩轉株
實驗流程
1.取對數生長期的各組細胞，分別用0.25％胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞，并把細胞懸浮在10％胎牛血清的DMEM培養液中備用。
2.將細胞懸液作梯度倍數稀釋，每組細胞分別別以每50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含10mL37C預溫培養液的皿中并輕輕轉動，使細胞分散均勻。置37C5％C02及飽和濕度的細胞培養箱中培養2～3周。
3.經常觀察，當培養皿中出現肉眼可見的克隆時，終止培養。棄去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4％6多聚甲醛固定細胞5mL固定15分鐘。然后去固定液，加適量 GIMSA應用染色液染10～30分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥。
4.將平皿倒置并疊加一張帶網格的透明膠片，用肉眼直接計數克隆，或在顯徴鏡(低倍鏡)計數大于10個細胞的克隆數。*后計算克隆形成率。克隆形成率=(克隆數/接種細胞數)×100％
細胞黏附實驗
服務簡介
細胞黏附性是維持組織結構穩定的基本條件，也是細胞運動和發揮功能的調節因素，并且對細胞的增殖、分化有重要影響。通常可分為兩類，即細胞與細胞黏附和細胞與基質黏附。機體內許多細胞，如上皮細胞，需要牢固地定在某處發揮功能;另一些細胞，如白細胞，活躍運動，就需要不斷調節細胞黏附。細胞黏附性的改變在腫瘤轉移過程中也發揮著重要作用。惡性腫瘤具有從原發瘤分離及在體內擴散的能力，提示這些細胞在相互識別及黏附機制方面發生了改變。
血管形成實驗
服務簡介
在原有的毛細血管和(或)微靜脈基礎上通過血管內皮細胞的遷移和增殖，從已存在的血管處以芽生或非芽生(套迭)形式形成新的、以毛細血管為主的血管系統過程稱之為血管生成，通過體外模擬血管生成的過程對研究血管形成機制、發現促進或抑制血管生成藥物十分重要。 |
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