關鍵詞：4-羥乙基哌嗪乙磺酸、HEPES、CAS7365-45-9、德晟
HEPES中文全稱4-羥乙基哌嗪乙磺酸，CAS為7365-45-9，hepes緩沖液的主要成分是羥乙基哌嗪乙硫磺酸（2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid），HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力。其*大優點是在開放式培養或細胞觀察時能維持較恒定的PH值.在這種培養條件下,細胞培養瓶的蓋子應擰緊,以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。
大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養液呈橙黃色,堿性培養液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒. 原則上,HEPES作為緩沖劑可用來代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養環境的限制.實際操作中并非如此簡單. 溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長也是很重要的。
HEPES使用方法有兩種：
(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中，再過濾除菌。每1000ml培養液中加入2.38克HEPES，待溶后用lN NaOH 調pH至7.2，濾過除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10 mmol/L。
(2)亦可配成 100 x 貯存液(l mol/L)，使用前取 99ml培養液加入 lml貯存液，*終應用濃度仍為10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES貯存液配制方法：取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中，用lN NaOH調pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。
4-羥乙基哌嗪乙磺酸對細胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L，一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。可用于生物緩沖劑；分離與分析RNA核組分的反應緩沖液、預雜交緩沖液、雜交緩沖液；用于RNA與T4RNA。分子生物學級用于用T4RNA連接酶Chemicalbook進行RNA3'-末端標記，分離與分析核RNA之反應緩沖液組分、預雜交緩沖液緩和雜交緩沖液成分。細胞-細胞黏附，細胞短期聚集培養，清洗組織、細胞所用緩沖液。
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