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泰特儀器液相色譜儀中化學(xué)鍵合固定相的應(yīng)用方法
    化學(xué)鍵合固定相一般都采用硅膠(薄殼型或全多孔微粒型)為基體。在鍵合反應(yīng)之前，要對(duì)硅膠進(jìn)行酸洗、中和、干燥活化等處理，然后再使用硅膠表面上的硅羥基與各種有機(jī)型硅化合物起反應(yīng)，制備化學(xué)鍵合固定相。液相色譜儀中化學(xué)鍵合固定相的特點(diǎn)是耐溶劑沖洗，并且可以通過改變鍵合相有機(jī)官能團(tuán)的類型來(lái)改變分離的選擇性。
1．鍵合相的性質(zhì)
    目前，化學(xué)鍵合相廣泛采用微粒多孔硅膠為基體，用烷烴二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷與硅膠表面的游離硅醇基反應(yīng)，形成Si-O-Si-C鍵形的單分子膜而制得。硅膠表面的硅醇基密度約為5個(gè)/nm2，由于空間位阻效應(yīng)（不可能將較大的有機(jī)官能團(tuán)鍵合到全部硅醇基上）和其它因素的影響，使得大約有40~50%的硅醇基未反應(yīng)。
    殘余的硅醇基對(duì)鍵合相的性能有很大影響，特別是對(duì)非極性鍵合相，它可以減小鍵合相表面的疏水性，對(duì)極性溶質(zhì)（特別是堿性化合物）產(chǎn)生次級(jí)化學(xué)吸附，從而使保留機(jī)制復(fù)雜化（使溶質(zhì)在兩相間的平衡速度減慢，降低了鍵合相填料的穩(wěn)定性。結(jié)果使堿性組分的峰形拖尾）。為盡量減少殘余硅醇基，一般在鍵合反應(yīng)后，要用三甲基氯硅烷(TMCS)等進(jìn)行鈍化處理，稱封端（或稱封尾、封頂，end-capping），以提高鍵合相的穩(wěn)定性。另一方面，也有些ODS填料是不封尾的，以使其與水系流動(dòng)相有更好的“濕潤(rùn)”性能。
    由于不同生產(chǎn)廠家所用的硅膠、硅烷化試劑和反應(yīng)條件不同，因此具有相同鍵合基團(tuán)的鍵合相，其表面有機(jī)官能團(tuán)的鍵合量往往差別很大，使其產(chǎn)品性能有很大的不同。鍵合相的鍵合量常用含碳量(C%)來(lái)表示，也可以用覆蓋度來(lái)表示。所謂覆蓋度是指參與反應(yīng)的硅醇基數(shù)目占硅膠表面硅醇基總數(shù)的比例。
    pH值對(duì)以硅膠為基質(zhì)的鍵合相的穩(wěn)定性有很大的影響，一般來(lái)說(shuō)，硅膠鍵合相應(yīng)在pH=2~8的介質(zhì)中使用。
2．鍵合相的種類
    化學(xué)鍵合相按鍵合官能團(tuán)的極性分為極性和非極性鍵合相兩種。
    極性鍵合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)鍵合相。極性鍵合相常用作正相色譜，混合物在極性鍵合相上的分離主要是基于極性鍵合基團(tuán)與溶質(zhì)分子間的氫鍵作用，極性強(qiáng)的組分保留值較大。極性鍵合相有時(shí)也可作反相色譜的固定相。常用的非極性鍵合相主要有各種烷基(C1~C18)和苯基、苯甲基等，以C18色譜柱應(yīng)用*廣。非極性鍵合相的烷基鏈長(zhǎng)對(duì)樣品容量、溶質(zhì)的保留值和分離選擇性都有影響，一般來(lái)說(shuō)，樣品容 |
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