河南專業科研細胞實驗技術EMSA實驗實驗-效勝實業
效勝實業河南專業科研細胞實驗技術服務EMSA實驗實驗
本公司開展了石蠟包埋、石蠟切片、冰凍切片、HE染色，massson染色，PAS染色等染色，免疫組化，免疫熒光，WB .PCR.透射電鏡，掃描電鏡，細胞培養等實驗服務；EMSA:凝膠遷移或電泳遷移率檢測是一種檢測蛋白質和DNA序列相結合的技術，最初用于研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用，可用于定性和定量分析。分為2種類型：同位素標記探針，非同位素標記探針。
通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同，可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白，或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時，依據目的RNA結合蛋白的位置，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特異），和其它非相關的片段（非特異），來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據復合物的特點和強度來確定特異結合。
實驗步驟：探針的標記，探針的純化，EMSA膠的配制，EMSA的結合反應，探針冷競爭反應，突變探針冷競爭，super-shift 反應，電泳。 |
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