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本公司開展了石蠟包埋、石蠟切片、冰凍切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)服務(wù);一、服務(wù)介紹

Masson染色用于膠原纖維和肌纖維的染色及鑒定;染色結(jié)果:膠原纖維呈藍(lán)色、肌纖維呈紅色、細(xì)胞核呈藍(lán)黑色。

二、實(shí)驗(yàn)原理

1.膠原纖維是人體中的結(jié)締組織的主要成分,分布在全身的各個(gè)部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時(shí)呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質(zhì)是具有一定韌性及緊固性,因此它能夠抵抗一定的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細(xì)不等的束,呈波浪狀。膠原纖維由許多根纖細(xì)的膠原纖維組成。在電鏡下膠原原纖維又由更細(xì)的原纖維構(gòu)成。根據(jù)Kramen和Little所進(jìn)行的電鏡研究證實(shí),膠原纖維是特有的,具有橫紋的(重復(fù)期為650)原纖維。當(dāng)有病變時(shí)這些纖維可發(fā)生變形,常出現(xiàn)的就是膠原纖維的壞死,膠原纖維在稀酸里可發(fā)生膨脹,變成膠樣物。它們能被酸性染料染成深淺不一的粉紅色,這些往往跟淀粉樣物難以區(qū)別。由于它們的屈光率較弱,因而在光學(xué)顯微鏡下,很難與纖維區(qū)別。膠原纖維的分子長(zhǎng)度約為3000,直徑約為14,分子量為300000。

2.膠原纖維的組成:

1) 細(xì)胞內(nèi)合成前膠原蛋白分子,成纖維細(xì)胞攝取合成蛋白質(zhì)所需的氨基酸,包括脯氨酸、賴氨酸和甘氨酸。在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體上按照特定的膠厚mRNA的堿基序列,合成前α-多肽鏈。后者邊合成邊進(jìn)入粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,并在羥化酶的作用下,將肽鏈中的脯氨酸和賴氨酸羥化經(jīng)羥化后,三條前α-多肽鏈互相纏繞成繩索狀的前膠原蛋白分子。溶解狀態(tài)的前膠原蛋白分子,兩端未纏繞,呈球狀構(gòu)形,在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔風(fēng)或轉(zhuǎn)移到高爾基復(fù)合體內(nèi)加入糖基后,分泌到細(xì)胞外。

2) 厚膠原蛋白分子的細(xì)胞外聚合。細(xì)胞外的前膠原蛋白分子,在肽內(nèi)切酶的作用下,切去分子兩端球狀構(gòu)表部分,形成厚膠原蛋白分子,粗約1.5nm,長(zhǎng)約300nm,厚膠原蛋白分子平行排列聚合成膠原纖維。聚合時(shí),相互平的相鄰分子錯(cuò)開1/4分子長(zhǎng)度,同一排的分子,菌尾相對(duì)并保持一定距離,聚合成束,于是形成具有64nm周期橫紋的膠原原纖維。聚合時(shí),分子內(nèi),分子間的化學(xué)基因進(jìn)行縮合,交聯(lián),增加厚纖維的穩(wěn)固性。若干膠原原纖維經(jīng)糖蛋白粘合成粗細(xì)子等的膠原纖維。中性自溶型膠原(neutrla-soluble collagen)→醛糖、縮醛類脂/肉豆蔻酸、類脂→不溶型膠原(insoluble collagen)

3.膠原纖維的顯示:

膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色,除此之外,它還可以用一些陰離子的染料來進(jìn)行

 
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