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河南效勝實業有限公司
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河南專業科研細胞實驗技術服務石蠟切片/冰凍切片實驗-效勝實業 |
效勝實業河南專業科研細胞實驗技術服務石蠟切片/冰凍切片實驗
本公司開展了石蠟包埋、石蠟切片、冰凍切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細胞培養等實驗服務服務介紹
1)技術原理:
石蠟切片(paraffin section)是組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。活的細胞或組織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷
2)特點:
石蠟切片標本可以長期保存使用,為永久性顯微玻片標本。
冰凍切片制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷.組織變化不大,能很好保存脂肪,類脂等成分。能夠比較完好地保存各種抗原活性及酶類,特別是對于那些對有機溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細胞膜表面抗原和水解酶保存較好。
石蠟切片
(一)石蠟切片前的準備
1.切片刀。傳統的切片刀在使用之前,一定要在顯微鏡下檢查刀口的損傷程度,然后進行磨刀。現在也可以使用一次性刀片,可省去磨刀。
2.修整蠟塊:切去組織周圍過多的石蠟,一般情況下在組織周圍留有約1~2mm的石蠟邊,兩邊必須平行。
3.蠟塊固定:修整好的蠟塊先固定在事先準備好的小方木塊或者金屬塊上,固定方法是把蠟鏟先在酒精燈上加熱,再將蠟塊底部烙熔,迅速烙粘在小方木塊或金屬塊底座上。
4.載玻片擦洗干凈后,在其表面涂上粘附劑(蛋白甘油、APES或多聚賴氨酸),根據染色方法選擇不同的粘附劑。
5.準備好毛筆、鑷子、染色架。
6.調好展片器內水的溫度(45℃),有時也可以加些酒精到水中。
(二)石蠟切片
1.將切片刀裝在刀片機的刀架上并固定緊,固定蠟塊底座或蠟塊,調整蠟塊與刀至合適位置,刀刃與蠟塊表面呈5度角。
2.切片多使用輪轉式切片機,切片時,左手執毛筆,右手轉切片機轉輪,先修出組織塊。
3.調整切片機上 |
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