一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的三聚氰胺和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭三聚氰胺抗體，加入酶標記物后，用底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負相關，與標準曲線比較可得出相應三聚氰胺的含量。
二、試劑盒檢測限
試劑盒檢測限： 10 ng/mL
三、 試劑盒組成
1．預包被板：96T
2．標準品液：（1mL/瓶） 0 ng/mL、20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL
3．酶標記物 12 mL
4．抗體工作液 7 mL
5．底物緩沖液 7 mL
6．底物液 7 mL
7．終止液 7 mL
8．20倍濃縮洗滌液 50 mL
四、樣本處理
配制樣品稀釋液：
稱取89.5 g Na2HPO4·12H2O ，蒸餾水定容至1000 mL。
濕的寵物食品萃取方法（稀釋100倍）
1．勻質樣品到布丁狀；
2．稱取2 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將其收集于干凈試管中；
5．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
6．取50 μL進行實驗。
干的寵物食品萃取方法（稀釋200倍）
1．均質干的寵物飼料樣品；
2．稱取1 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將萃取液收集于干凈試管中；
6．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
7．取50 μL進行實驗。 |
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