簡介
miRNA（microRNA）是一類近幾年在真核生物中發現的一類具有調控功能的非編碼RNA，長度約20-24個核苷酸，是發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成，主要參與基因轉錄后水平的調控。近來發現它們在果蠅的細胞增殖、死亡及脂肪代謝，線蟲極性的形成，哺乳動物的造血干細胞的分化等過程中起了重要的調控作用。在植物中，miRNA還參與了葉子與花的發育過程。動物（尤其是人）miRNA的生物合成過程已經初步闡明：首先，miRNA基因的初級轉錄產物（pri-miRNA）在細胞核中被RNaseIII Drosha切割成為前體miRNA（pre-miRNA），在最初的剪切后，pre-miRNA在轉運蛋白exportin-5的作用下由核內轉到胞質中，然后由另一種RNaseIII Dicer進一步切割產生成熟的miRNA。這些成熟的miRNA與其他蛋白質一起組成RISC（RNA-induced silencing complex）復合體，從而引起靶mRNA的降解或者翻譯抑制。
miRNA過表達慢病毒服務流程
實驗流程
優勢
pre-miRNA策略
合成pre-miRNA構建到含有mir30側翼雙臂序列的慢病毒過表達載體
直接合成，免去基因調取流程，易于通量化
pri-miRNA策略
從基因組中調取pri-miRNA后構建到慢病毒過表達載體
保存miRNA天然雙臂
miRNA抑制慢病毒服務
miRNA抑制劑(miRNA inhibitor)表達后則高效、特異地結合細胞內成熟的靶miRNA，形成穩定的復合物，阻止了miRNA對靶標mRNA的降解或者翻譯抑制，上調miRNA靶標基因的表達。
實驗流程
優勢
SiRNA抑制
采用U6或H1之類的POL III啟動子驅動抑制miRNA片段。
直接合成，免去基因調取流程
MiRNA
Sponge
采用串聯的多個miRNA互補序列形成吸附“海綿”
高效，可實現組織特異性表達
輝駿載體列表
miRNA載體
載體骨架元件
應用
FT301
CMV-RFP-MCS-EF1-PURO
miRNA過表達
FT302
CMV-MCS-EF1-PURO
miRNA過表達
FT303
U6-MCS-CMV-EGFP
miRNA抑制
FT304
CMV-GFP-H1-MCS
miRNA抑制
注：此列表為常用miRNA載體樣板，更多載體骨架要求請咨詢客服。可根據客戶要求做啟動子或者標簽改造，個性化定制！ |
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