一、慢病毒包裝概述-輝駿生物
慢病毒(Lentivirus)載體是以人類免疫缺陷型病毒(HIV)為基礎發展起來的基因治療載體,能同時感染分裂分裂細胞和非分裂細胞,并且可以整合到細胞基因組中高效表達,慢病毒中的毒性基因已經被剔除并被外源性目的基因所取代,屬于假型病毒。
慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。將外源基因克隆進入表達載體,同時與包裝質粒(表達病毒包裝所需輔助蛋白)一起轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中,收取培養基離心后可直接用于感染宿主細胞,當目的基因進入細胞后被整合到宿主基因組,從而高效表達目的基因。
二、慢病毒轉染具有以下特點-輝駿生物
1.外源基因表達水平較高、表達穩定;
2.轉染效率高,可感染分裂和不分裂的細胞,幾乎可以感染所有類型的細胞,特別適合質粒載體轉染效率低的細胞;
3.慢病毒基因容易操作,易于制備大量病毒且滴度高;
4.病毒基因組可整合到細胞基因組,易于構建穩定細胞株。
三、慢病毒包裝服務內容-輝駿生物
1.客戶提供插入片段信息;如序列、NCBI登錄號等;
2.將目的片段克隆到慢病毒表達載體上;
3.慢病毒包裝、擴增、滴度的測定;
4.實驗報告提交。
四、客戶提供:
1.客戶提供慢病毒包裝的實驗方案;
2.若客戶只提供組織、細胞等樣本,還需提供目的基因NCBI登錄號,本公司將額外收取RNA提取及逆轉錄費用;
3.對于本公司已有的載體和模版,免費提供。
五、實驗報告內容:
1.含目的片段的慢病毒一份,可直接用于轉染;
2.引物序列、載體圖譜、測序結果各一份;
3.慢病毒包裝實驗所需試劑耗材、儀器設備、實驗方法各一份。 |
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