輝駿生物在液相途徑的蛋白質組學方面具有強大的實力和豐富的經驗，已為各地科研單位提供數十例iTRAQ技術服務。
一、iTRAQ概述
iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation，iTRAQ）定量分析蛋白質的基本原理是利用iTRAQ試劑是可與氨基酸末端氨基及賴氨酸側鏈氨基連接而標記上肽段,經過色譜分離，一級質譜和二級質譜分析，在質譜圖中，被標記的不同樣本中的同一肽段表現為相同的質荷比。在串聯質譜中，信號離子表現為不同質荷比(114～121)的峰，因此根據波峰的高度及面積，可以鑒定出蛋白質和分析出同一蛋白質不同處理的定量信息。
二、iTRAQ試劑結構
圖1：iTRAQ試劑包括三部分：報告部分、肽反應部分、平衡部分。1、報告部分有八種：114-121，因此iTRAQ試劑可同時標記8組樣品。2、肽反應部分：能與肽N端及賴氨酸側鏈氨基發生共價連接而標記上肽段。3、平衡部分：保證被標記的同一肽段的質荷比相同。
三、與傳統雙向電泳定量分析相比，iTRAQ具有以下技術優勢
1、靈敏度高，檢測限低，可檢測出低豐度蛋白；
2、分離能力強,分析范圍廣,iTRAQ可以對任何類型的蛋白質進行鑒定，包括高分子量蛋白質、酸性蛋白和堿性蛋白，膜蛋白和不溶性蛋白；
3、 高通量：同時對8個樣本進行分析，提高了實驗通量，可同時對多個時間點或不同處理的蛋白質進行分析；
4、結果可靠：定性與定量分析結果更加可靠；
5、自動化程度高：液相與質譜連用，自動化操作，分析速度快，分離效果好。
四、iTRAQ技術服務流程
圖2：iTRAQ技術流程。
五、iTRAQ技術服務內容
1、樣本制備與定量；iTRAQ試劑標記；
2、液相分離和質譜分析；數據庫檢索；
3、蛋白質定量分析；
4、相關生物信息分析；
5、實驗報告提交。
六、送樣須知
1、技術咨詢：在您開始實驗之前，本公司將為您竭誠提供最有效的iTRAQ實驗設計方案；
2、為了保證iTRAQ實驗能順利進行，樣品寄送需滿足以下要求：
基本要求：iTRAQ試劑可以標記任何類型的樣本，如組織、細胞、細菌等材料。因此本公司接受任何類型的樣本，對于不同的樣本需要的量有所不同，具體需要量請咨詢本公司。
運輸要求：液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。
注：樣本應避免各類污染和反復凍融。
七、iTRAQ實驗報告內容
1、蛋白定鑒定和定量分析結果；
2、顧客指定蛋白質對應的質譜峰圖；
3、實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。
八、iTRAQ實驗服務案例
圖3：iTRAQ定量分析結果。蛋白質樣品經過四種iTRAQ（114-117）試劑標記后，質譜分析，每一質譜峰面積代表同一蛋白質不同處理的表達豐度。
九、服務周期及收費標準：歡迎登陸 http://www.fitgene.com/ 服務熱線 400-699-1663
十、服務質量承諾
1、本公司將為您提供嚴謹的iTRAQ實驗設計方案
2、提供客觀的iTRAQ實驗分析結果。 |
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