輝駿生物已成功為各地科研單位服務(wù)超過3000張雙向凝膠電泳，數(shù)據(jù)已發(fā)表在權(quán)威專業(yè)雜志Proteomics. 上。
一、DIGE概述
DIGE — 雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)，是在傳統(tǒng)雙向電泳的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的新型蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù)，其分離蛋白質(zhì)混合的原理與雙向電泳是一致的，主要利用蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量的差異來分離蛋白質(zhì)混合物，同時(shí)應(yīng)用熒光染料的靈敏度及內(nèi)標(biāo)的使用等技術(shù)，使其在定量蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)雙向電泳。
DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5，它們能與蛋白質(zhì)的賴氨酸側(cè)鏈氨基反應(yīng)而使蛋白質(zhì)被標(biāo)記，被標(biāo)記蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量幾乎不受影響，等量混合標(biāo)記好的蛋白質(zhì)后進(jìn)行雙向電泳，不同凝膠之間可以通過cy2內(nèi)標(biāo)匹配，消除凝膠之間的差異，蛋白質(zhì)表達(dá)量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強(qiáng)度來體現(xiàn)。
二、與常規(guī)雙向電泳后，銀染或考染膠相比，DIGE具有以下優(yōu)勢：
1、靈敏度高，*低可檢測到125pg的蛋白質(zhì)；
2、高效性，同一塊凝膠上可以電泳兩個(gè)樣品，減輕了工作量；
3、線性范圍更廣,動態(tài)范圍高達(dá)10-5；
4、定量精確, 采用內(nèi)標(biāo)消除了凝膠與凝膠之間的實(shí)驗(yàn)誤差，顯著提高了實(shí)驗(yàn)的精確度和可重復(fù)性；
5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，ImageMaster7.0（DIGE）軟件可以得到統(tǒng)計(jì)學(xué)可信的結(jié)果，降低了操作者之間的偏差。
三、DIGE技術(shù)服務(wù)流程
四、DIGE技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
1、 樣本制備與定量；
2、熒光標(biāo)記；
3、雙向電泳和圖片分析；
4、DIGE實(shí)驗(yàn)報(bào)告提交。
五、送樣須知：
1、技術(shù)咨詢：在您開展實(shí)驗(yàn)之前，本公司將為您竭誠提供*有效的DIGE實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案。
2、為了保證DIGE實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行，樣品須液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。
注：樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。
六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容
1、DIGE熒光電子圖片；
2、蛋白質(zhì)點(diǎn)定量分析結(jié)果，包括差異點(diǎn)號碼、差異倍數(shù)、pI和MW等；
3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。
七、DIGE實(shí)驗(yàn)案例
DIGE定量分析結(jié)果。蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過熒光染料標(biāo)記后雙向電泳，ImageMaster7.0 (DIGE)分析差異點(diǎn)結(jié)果。
八、服務(wù)周期及收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：歡迎登陸 http://www.fitgene.com/ 服務(wù)熱線 400-699-1663
九、質(zhì)量承諾：
1、cy2作為內(nèi)標(biāo)，確保定量的準(zhǔn)確；
2、提供客觀的DIGE實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。 |
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