1．說明
本檢測采用酶聯免疫法定量檢測神經性貝毒的存在。神經性貝毒是一種毒素，與貝殼類動物的神經中毒有關。本檢測可用于水產樣本對貝類毒素的定性和定量檢測，例如甲殼類動物的樣本。對于甲殼類動物的需要提前制備樣本。如果條件允許，陽性樣本可以做HPLC，GC/MS或其他方法確認。
2．安全性說明
標準品溶液含有少量的神經性貝毒。底物溶液含有四甲基聯苯胺，終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸，可用水洗去。
3．貯藏與穩定性
試劑盒貯存在4-8°C。使用前試劑盒中溶液要恢復到室溫20—25度。在保質期內試劑盒都可以正常使用。
4．檢測原理
本實驗采用直接競爭ELISA方法，用特異性抗體識別神經性貝毒。樣本中的神經性貝毒可與貝毒-酶-結合物競爭，同包被在微孔板上的羊抗-神經性貝毒抗體結合。洗板加入底物溶液，顯藍色。藍色的深度與神經性貝毒在樣本中的濃度成反比。顏色反應在規定時間內終止，顏色用酶標儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過標準曲線來讀取。
A試劑盒包括
7.終止液，2 X 6ml
8.海水前處理溶液25ml
C檢測步驟
D結果分析
結果分析可以利用商業ELISA分析軟件(4-parameters,Logit/Log)。手工計算可以先計算標準的吸光度值的平均值，然后計算每個標準的%B/B0（用其它標準的吸光度值除以零標準的吸光度值乘以100%）。以每個標準的%B/B0做Y軸，以每個標準的神經性貝毒的濃度做X軸構建標準曲線。通過利用標準曲線，把對照和樣品的%B/B0代入標準可以計算出樣品中神經性貝毒的濃度。樣品中神經性貝毒的含量小于0.01 ppb認為陰性。當樣品中神經性貝毒的含量大于2.0 ppb要稀釋后再測定。 |
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