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供應TAP-MS串聯親和純化質譜實驗服務

供應TAP-MS串聯親和純化質譜實驗服務_廣州輝駿生物科技股份有限公司_供應TAP-MS串聯親和純化質譜實驗服務

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公　司：廣州輝駿生物科技股份有限公司

發布時間：2024年08月08日

有效期：2025年02月07日

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公司主頁：	http://fitgene.qy6.com.cn(加入收藏)

詳細說明

TAP-MS串聯親和純化質譜實驗原理

過表達TST-Flag雙標簽融合蛋白的細胞，經裂解后先與Streptactin珠子孵育、初次洗滌及洗脫，釋放出蛋白復合物；再將此蛋白復合物與anti-Flag珠子結合、再次洗滌，*后的洗脫產物用質譜鑒定未知的互作蛋白。

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18927549347

TAP-MS串聯親和純化質譜實驗流程

應用領域

TAP MS應用背景

TAP技術采用兩步親和純化，提高了純化產物的特異性，具有周期短、假陽性結果少等優點。通過這種方法鑒定到的蛋白質相互作用能真實地反映出細胞中蛋白質分子之間的聯系，實驗結果更加接近真實情況，而且TAP技術還特別適用于蛋白質組水平上的大規模研究。

TAP-MS實驗研究案例—客戶文章解析

鳥嘌呤核苷酸交換因子的差異rac1信號涉及FLII在調節rac1驅動的細胞遷移中的作用

研究路線
1

過表達與 pull down實驗證實Tiam1和P-Rex1誘導不同的rac1下游效應

2

通過TAP/ SILAC結合的方法檢測 Tiam1或 P-Rex1誘導后的rac1相互作用體，證實Tiam1和P-Rex1對racl互動體有不同的調控作用

3

免疫共沉淀、 GST pull down和PLA實驗結果證實FLII優先與活性racl結合FLII是一種新的富含P-RExl的rac1結合伙伴

4

結構域分析證實FLII通過不同的結構域與rac1和P-Rex1結合

5

Pull down實驗和細胞遷移實驗證實FLII是P-REx1-rac1驅動的細胞遷移所必需的

6

基因敲除實驗表明P-Rex1可以通過FLII介導特定的細胞功能，包括細胞收縮，從而促進細胞遷移

研究結論

研究證實P-Rex1不僅能激活rac1，而且還能將蛋白質(如FLII)定向到rac1的活性形式，以介導特定的細胞功能，包括細胞收縮，從而使P-Rex1能夠促進細胞遷移。

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