過氧化物酶可催化過氧化氫的氧化反應,在Trinder反應、酶聯免疫、魯米諾發光反應中催化顯色底物、發光底物與過氧化氫的反應。過氧化物酶還有一些替代物,也能具有催化活性。
過氧化物酶替代物
過氧化物酶是一類能催化過氧化氫氧化分類或胺類(如苯分、Trinder’s試劑、魯米諾)的酶,含有亞鐵原卟啉輔基,過氧化物酶、過氧化氫酶,另外過氧化物模擬酶和血紅蛋白也都具有過氧化物酶活性,因此其中一部分被開發成過氧化物酶的替代物。
過氧化物酶催化底物魯米諾
血紅蛋白作為過氧化物酶代替物
血紅蛋白(Hb)可作為辣根過氧化物酶(HRP)的替代物,用于催化H2O2氧化對甲基分的反應體系。通過研究血紅蛋白的過氧化物酶特征及其酶催化動力學特性,穩態速率法測定米氏常數(Km)、米氏速率(Vm)及反應級數等動力學參數,可以了解血紅蛋白催化其氫供體底物對甲基分的酶催化反應機理,確立反應速率方程。實驗比較發現血紅蛋白作為過氧化物酶(HRP)的替代物,其催化活性比氯化血紅素(Hemin)以及β-環hujing-氯化血紅素(β-CD-Hemin)等過氧化物模擬酶要高。
魯米諾的發光檢測中,需要過氧化物酶(POD或HRP)來催化,但在微量血跡檢測中,不要添加酶,正是因為血液中含有血紅蛋白的緣故。
過氧化物酶與過氧化氫酶
過氧化氫酶也屬于過氧化物酶的一種,可催化過氧化氫的反應,不過有區別。在POD催化顯色底物或發光底物的時候,底物有兩種:過氧化物氫和作為氫供體的新型Trinder’s試劑、TMB或魯米諾。而在過氧化物氫酶的催化中,底物只有過氧化氫,同時也作為氫供體。
血紅蛋白作為過氧化物酶替代物時不具有過氧化氫酶活性,不能直接催化過氧化氫的反應,需要分類或魯米諾作為底物。德晟是體外診斷行業老牌廠家,可提供過氧化物酶檢測體系的各種酶制劑、顯色底物、發光底物及緩沖劑。 |
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