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KinExA分子與完整細(xì)胞相互作用系統(tǒng) KinExA分子與完整細(xì)胞相互作用系統(tǒng)_上海雙墨生物科技有限公司_KinExA分子與完整細(xì)胞相互作用系統(tǒng)

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公 司: 上海雙墨生物科技有限公司
發(fā)布時(shí)間:2018年10月26日
有 效 期:2019年04月24日
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    1、與SPR的區(qū)別:SPR在芯片表面固定一個(gè)分子,通過(guò)芯片表明與溶液間二維相互作用的物質(zhì)量改變而實(shí)現(xiàn)SPR檢測(cè)。這就帶來(lái)了非常顯著的缺點(diǎn):固定在芯片上的生物分子可能不能維持其天然活性、質(zhì)量遷移影響動(dòng)力學(xué)分析(例如,流速會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果)、被檢測(cè)分子有分子量下限限制、非常大的分子或者生物結(jié)構(gòu)其分子量有上限限制、樣品需要純化及無(wú)法檢測(cè)完整細(xì)胞。相反,KinExA分析三維水平及游離狀態(tài)相互作用,不固定任何分子、不會(huì)對(duì)平衡帶來(lái)影響、沒(méi)有質(zhì)量遷移的限制、可以檢測(cè)未純化樣品和完整細(xì)胞;因此,極寬范圍內(nèi)的生物分子、生物結(jié)構(gòu)及完整細(xì)胞均可靈活分析。

應(yīng)用一、KinExA在CAR-T細(xì)胞治療中的應(yīng)用
CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制研究及檢測(cè)項(xiàng)目一般應(yīng)包括:細(xì)胞數(shù)量及其存活率、細(xì)胞表型、CAR陽(yáng)性率檢測(cè)、生物學(xué)效力檢測(cè),無(wú)菌檢測(cè)、支原體、熱原/內(nèi)毒素的檢測(cè)、CAR-T細(xì)胞中病毒載體拷貝數(shù)及整合的檢測(cè)等。如果能夠檢測(cè)CAR-T細(xì)胞與抗原分子的親和力,以及CAR-T細(xì)胞上抗體的表達(dá)量,無(wú)疑會(huì)提升CAR-T細(xì)胞的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
目前市面上除了KinExA技術(shù)外,沒(méi)有其他特別有效的方式檢測(cè)完整細(xì)胞與分子間的親和力,更無(wú)從判斷細(xì)胞上分子的表達(dá)量。KinExA技術(shù)可以檢測(cè)細(xì)胞與分子間的親和力,并且可以計(jì)算細(xì)胞上分子的表達(dá)量。其檢測(cè)原理如下圖,先將梯度稀釋的細(xì)胞與恒定濃度的分子共同孵育達(dá)到平衡,離心之后收集上清液(此時(shí)上清液中只存在游離的分子),再通過(guò)已提前包被過(guò)的珠子捕獲游離的分子,用熒光標(biāo)簽的抗體檢測(cè)游離分子的量,通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)得到相應(yīng)的數(shù)值后,利用KinExA系統(tǒng)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

國(guó)內(nèi)某知名CAR-T公司通過(guò)KinExA技術(shù)檢測(cè)CAR-T細(xì)胞與抗原分子間相互作用的結(jié)果表明,CAR-T細(xì)胞與抗原的親和力Kd為45.41pM,T細(xì)胞表面CAR的表達(dá)水平為1.368e+5,Kd與EL的95%置信區(qū)間均較窄,數(shù)據(jù)非常準(zhǔn)確可信。

應(yīng)用二、KinExA在高親和力檢測(cè)上應(yīng)用
對(duì)于抗腫瘤藥市場(chǎng),目前精準(zhǔn)醫(yī)療最為成熟的領(lǐng)域還是以靶向藥物為代表的抗腫瘤藥物。由于單克隆抗體類抗癌藥的副作用較小,且靶向性更好,因此,單抗藥物仍將是引領(lǐng)抗腫瘤藥物發(fā)展最為重要的領(lǐng)域。以PD-1為靶點(diǎn)的一類單抗藥呈現(xiàn)出較高的親和力,常規(guī)的相互作用檢測(cè)系統(tǒng)例如SPR 、BLI、ITC等由于自身原理的限制均不能檢測(cè)高親和力(pM級(jí)別)。KinExA技術(shù)有別于常規(guī)的相互作用檢測(cè)系統(tǒng),能準(zhǔn)確有效的檢測(cè)高親和力(fM級(jí)別)。


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