1、與SPR的區別：SPR在芯片表面固定一個分子，通過芯片表明與溶液間二維相互作用的物質量改變而實現SPR檢測。這就帶來了非常顯著的缺點：固定在芯片上的生物分子可能不能維持其天然活性、質量遷移影響動力學分析（例如，流速會影響實驗結果）、被檢測分子有分子量下限限制、非常大的分子或者生物結構其分子量有上限限制、樣品需要純化及無法檢測完整細胞。相反，KinExA分析三維水平及游離狀態相互作用，不固定任何分子、不會對平衡帶來影響、沒有質量遷移的限制、可以檢測未純化樣品和完整細胞；因此，極寬范圍內的生物分子、生物結構及完整細胞均可靈活分析。
應用一、KinExA在CAR-T細胞治療中的應用
CAR-T細胞治療產品的質量控制研究及檢測項目一般應包括：細胞數量及其存活率、細胞表型、CAR陽性率檢測、生物學效力檢測，無菌檢測、支原體、熱原/內毒素的檢測、CAR-T細胞中病毒載體拷貝數及整合的檢測等。如果能夠檢測CAR-T細胞與抗原分子的親和力，以及CAR-T細胞上抗體的表達量，無疑會提升CAR-T細胞的質量控制標準。
目前市面上除了KinExA技術外，沒有其他特別有效的方式檢測完整細胞與分子間的親和力，更無從判斷細胞上分子的表達量。KinExA技術可以檢測細胞與分子間的親和力，并且可以計算細胞上分子的表達量。其檢測原理如下圖，先將梯度稀釋的細胞與恒定濃度的分子共同孵育達到平衡，離心之后收集上清液（此時上清液中只存在游離的分子），再通過已提前包被過的珠子捕獲游離的分子，用熒光標簽的抗體檢測游離分子的量，通過檢測器檢測得到相應的數值后，利用KinExA系統軟件進行數據分析。
國內某知名CAR-T公司通過KinExA技術檢測CAR-T細胞與抗原分子間相互作用的結果表明，CAR-T細胞與抗原的親和力Kd為45.41pM，T細胞表面CAR的表達水平為1.368e+5，Kd與EL的95%置信區間均較窄，數據非常準確可信。
應用二、KinExA在高親和力檢測上應用
對于抗腫瘤藥市場，目前精準醫療最為成熟的領域還是以靶向藥物為代表的抗腫瘤藥物。由于單克隆抗體類抗癌藥的副作用較小，且靶向性更好，因此，單抗藥物仍將是引領抗腫瘤藥物發展最為重要的領域。以PD-1為靶點的一類單抗藥呈現出較高的親和力，常規的相互作用檢測系統例如SPR 、BLI、ITC等由于自身原理的限制均不能檢測高親和力（pM級別）。KinExA技術有別于常規的相互作用檢測系統，能準確有效的檢測高親和力（fM級別）。 |
 |
|
手機站
您當前位置是：商業機會 >> 儀器儀表 >> 生物儀器 >> KinExA分子與完整細胞相互作用系統
聯系信息
