石榴皮鞣素
操作步驟
試管法（改良 Mayer 法）
1、致敏羊紅細胞： 2%綿羊紅細胞加等量稀釋后的溶血素（ 1:2000），混勻，置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清：待測血清 0.2ml，加應用液 3.8ml，稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標準管：全溶血管:2%綿羊紅細胞 2ml 加 8ml 蒸餾水，混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置 37℃水浴 30min， 第 10 管為非溶血對照：補體 CH50 測定試管法
5、結果測定：取出試管， 2000r/min 離心 10min，對照管應不溶血。肉眼比色，選與 50%溶血標準管相近二管，再用分光光度計測（波長 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，
確定與標準管最接近者為終點管，然后按下公式計算 CH50 值：
血清補體 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀釋度。
如第 5 管為終點管，測待測血清中CH50為66.7U/ml。血清補體CH50正常值為50-100U/ml。
石榴皮鞣素
標本要求
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保
存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20
分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀
形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。
5.培養細胞:
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。
通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左
右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢
測，其余冷凍備用。
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