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公 司: 上海同科生物科技有限公司
發(fā)布時(shí)間:2017年10月31日
有 效 期:2018年05月02日
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郵  編: 200092
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公 司:上海同科生物科技有限公司

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詳細(xì)說明

    產(chǎn)品名稱:FlashPfu DNA 聚合酶
英文名稱:FlashPfu DNA Polymerase
產(chǎn)品規(guī)格:
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品規(guī)格 產(chǎn)品價(jià)格
TK01123 250U/管 ¥700
TK01125 500U/管 ¥1200




產(chǎn)品描述:同科FlashPfu 高保真DNA 聚合酶通過融合特殊持進(jìn)能力增強(qiáng)因子與精心改造過的pfu DNA聚合酶,是來源于超嗜熱古細(xì)菌的DNA聚合酶。該酶具有5'→3' 聚合酶活力, 3'→5' 核酸外切酶活力,并產(chǎn)生平頭末端產(chǎn)物。由于其具有高效的3'→5' 核酸外切酶活力(校正活力),使得PCR能獲得很好的保真性,F(xiàn)lashPfu DNA聚合酶的錯(cuò)配率約為Taq DNA聚合酶的1/50。FlashPfu DNA聚合酶的*快延伸速率可達(dá)5−6 kb/min,對于復(fù)雜模板也可達(dá)到2 kb/min。
特點(diǎn)與應(yīng)用:
1、高保真PCR——保真性為Taq DNA聚合酶的50倍
2、快速PCR——延伸速度15−30 s/kb
3、長片段PCR——基因組DNA ≤ 19 kb,λ DNA ≤ 30kb
4、生成用于平頭末端克隆的PCR產(chǎn)物
5、定點(diǎn)突變
活力單位定義:75°C、30分鐘內(nèi)使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定義為1個(gè)活性單位(U)。
儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存于-20℃。
注意事項(xiàng):
1、請等2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)完全溶解后再配制PCR反應(yīng)體系。
2、為了獲得的擴(kuò)增效果,擴(kuò)增前的所有操作請?jiān)诒线M(jìn)行。在室溫下,聚合酶活力可能會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。并且請將FlashPfu DNA Polymerase*后加入反應(yīng)體系,以避免酶的3’→5’核酸外切酶活力導(dǎo)致引物降解。
3、本產(chǎn)品擴(kuò)增產(chǎn)物的克隆請按照平頭末端克隆方法操作。
4、引物設(shè)計(jì):
1)引物Tm值計(jì)算請使用*鄰近法。請不要使用其他計(jì)算方法,它們計(jì)算得到的Tm值偏低,不適合本產(chǎn)品。
2)引物長度控制在20−35堿基,并且Tm > 60°C。
3)引物的GC含量盡量控制在40−60%。
4)在引物3’端以G或C結(jié)尾,可提高引物和模板結(jié)合效率。但是要避免3’端避免有多個(gè)G或C,防止非特異性結(jié)合。
5)正、反引物的Tm之差不要大于5°C。
6)正、反向引物的3’端避免相互互補(bǔ)。
7)擴(kuò)增長片段時(shí),引物長度控制在25−35堿基。
8)進(jìn)行定點(diǎn)突變時(shí),請將錯(cuò)配堿基靠近5’端。若錯(cuò)配堿基靠近3’端,可能會(huì)受本酶校正。
不要使用含有尿嘧啶和次黃嘌呤核苷的引物。
同科生物簡介:成立于2007年,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和技術(shù)


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