產品名稱:FlashPfu DNA 聚合酶
英文名稱:FlashPfu DNA Polymerase
產品規格:
產品編號 產品規格 產品價格
TK01123 250U/管 ¥700
TK01125 500U/管 ¥1200
產品描述:同科FlashPfu 高保真DNA 聚合酶通過融合特殊持進能力增強因子與精心改造過的pfu DNA聚合酶,是來源于超嗜熱古細菌的DNA聚合酶。該酶具有5'→3' 聚合酶活力, 3'→5' 核酸外切酶活力,并產生平頭末端產物。由于其具有高效的3'→5' 核酸外切酶活力(校正活力),使得PCR能獲得很好的保真性,FlashPfu DNA聚合酶的錯配率約為Taq DNA聚合酶的1/50。FlashPfu DNA聚合酶的*快延伸速率可達5−6 kb/min,對于復雜模板也可達到2 kb/min。
特點與應用:
1、高保真PCR——保真性為Taq DNA聚合酶的50倍
2、快速PCR——延伸速度15−30 s/kb
3、長片段PCR——基因組DNA ≤ 19 kb,λ DNA ≤ 30kb
4、生成用于平頭末端克隆的PCR產物
5、定點突變
活力單位定義:75°C、30分鐘內使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定義為1個活性單位(U)。
儲存條件:儲存于-20℃。
注意事項:
1、請等2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)完全溶解后再配制PCR反應體系。
2、為了獲得的擴增效果,擴增前的所有操作請在冰上進行。在室溫下,聚合酶活力可能會產生非特異性擴增。并且請將FlashPfu DNA Polymerase*后加入反應體系,以避免酶的3’→5’核酸外切酶活力導致引物降解。
3、本產品擴增產物的克隆請按照平頭末端克隆方法操作。
4、引物設計:
1)引物Tm值計算請使用*鄰近法。請不要使用其他計算方法,它們計算得到的Tm值偏低,不適合本產品。
2)引物長度控制在20−35堿基,并且Tm > 60°C。
3)引物的GC含量盡量控制在40−60%。
4)在引物3’端以G或C結尾,可提高引物和模板結合效率。但是要避免3’端避免有多個G或C,防止非特異性結合。
5)正、反引物的Tm之差不要大于5°C。
6)正、反向引物的3’端避免相互互補。
7)擴增長片段時,引物長度控制在25−35堿基。
8)進行定點突變時,請將錯配堿基靠近5’端。若錯配堿基靠近3’端,可能會受本酶校正。
不要使用含有尿嘧啶和次黃嘌呤核苷的引物。
同科生物簡介:成立于2007年,是一家集研發、生產、銷售和技術 |
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