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供應DNA 測序服務

供應DNA 測序服務_上海閃晶分子生物科技有限公司_供應DNA 測序服務

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公　司：上海閃晶分子生物科技有限公司

發布時間：2017年07月13日

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DNA測序原理

DNA測序技術主要依據 Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板，在特定條件下，用特異的引物在測序級DNA聚合酶的作用下，根據堿基互補配對原則，不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。這種鏈的延伸是通過引物的 3'- 羥基和脫氧核糖核苷酸底物的 5'- 磷酸基團形成磷酸二酯鍵來完成的。如果這種反應體系中加入雙脫氧核糖核苷酸 (ddNTP) ，這種 2'3'ddNTP 的 5'- 磷酸基團是正常的 (4 種不同的熒光標記 ) ，而 3' 位置缺少羥基，因此在 DNA 聚合酶作用下，仍然可以通過 5'- 磷酸基團與引物鏈的 3'- 羥基反應摻入到引物鏈中，但是由于 ddNTP 沒有 3'- 羥基，不能繼續與下一個 5'- 磷酸基團形成磷酸二酯鍵而導致引物鏈延伸的終止。這樣，在測序反應體系中， DNA 引物鏈不斷合成與偶然終止，產生一系列的長短不等的核苷酸鏈，然后將這些反應產物進行電泳，即可得測序圖譜。

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