BEAS-2B人正常肺上皮細(xì)胞
品牌: ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN 等
生長狀態(tài): 貼壁/懸浮
運輸方式: 常溫運輸/干冰運輸
物種來源: 鼠/人/豬/雞
細(xì)胞類型: 科研
數(shù)量: 99
規(guī)格: 25T
懸浮細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
2.擰松瓶蓋,細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過夜)
3.待細(xì)胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細(xì)胞層(2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的完全培養(yǎng)基(如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
懸浮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻
2.吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細(xì)胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復(fù)1項操作或者凍存
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮完全培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
4.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不佳或者培養(yǎng)過程中發(fā)生狀況,及時向?qū)嶒炇曳答仯员銓嶒炇疫M行售后跟蹤和處理
貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達到80%以后重復(fù)1項作或者凍存 |
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