Caco-2人結直腸腺癌細胞
品牌: ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN 等
生長狀態: 貼壁/懸浮
運輸方式: 常溫運輸/干冰運輸
物種來源: 鼠/人/豬/雞
細胞類型: 科研
數量: 99
規格: 25T
懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現培養瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室
2.擰松瓶蓋,細胞瓶豎立培養8h(或過夜)
3.待細胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細胞層(2ML左右轉移到新的培養瓶,加入新鮮的完全培養基(如細胞狀態較差可將血清濃度調高到15%)繼續培養
懸浮細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.將培養瓶/皿中的細胞重懸混勻
2.吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養瓶/皿
3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養基,使細胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培養基PH值變化情況和細胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復1項操作或者凍存
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮完全培養基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養基到新的培養皿/瓶繼續培養觀察。同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養基,培養觀察
3.若出現生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養
4.收到細胞后,若發現細胞狀態不佳或者培養過程中發生狀況,及時向實驗室反饋,以便實驗室進行售后跟蹤和處理
貼壁細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的完全培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存 |
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