上海Invitrogen脂質(zhì)體2000操作流程
1.5ml Invitrogen脂質(zhì)體2000產(chǎn)品說明書：
供應(yīng)人elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、兔elisa試劑盒等。標(biāo)本有：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
常用1.5ml Invitrogen脂質(zhì)體2000作用：
1、蛋白酶K：能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白，在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。
2、SDS：十二烷基硫酸鈉，溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜，并解離細(xì)胞中的核蛋白，SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷， 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似，所以它和乳糖一樣，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合，
使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化，四聚體解聚成單體，失去與操縱子特異性結(jié)合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是，
IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用極強(qiáng)的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的顯色試劑，在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418：一種抗生素，對幾乎所有的細(xì)胞都有毒性，是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染*常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方
6、DMSO：二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑，同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
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