中文名稱:紅四唑
英文名稱:2,3,5-Triphenyl-2H-tetrazolium chloride
中文別名:氯化三苯基四氮唑;2,3,5-三苯基-2H-四唑翁氯化物;2,3,5-三苯基氯化四唑;氯化-2,3,5-三苯基四氮唑;四氮唑紅;2,3,5-三苯基氯化四氮唑;三苯基氯化四唑;2,3,5-三苯基-2H-四唑氯;紅紅四氮唑;紅四氮唑(TTC);紅四氮唑;四唑紅;2,3,5-三苯基-2H-四唑鹽酸鹽;2,3,5-三苯基-2H-氯化四氮唑
CAS RN:298-96-4
EINECS號:206-071-6
分 子 式:C19H15ClN4
分 子 量;334.802
性質(zhì):TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物,其溶液無色,對微生物的生長繁殖都或多或少具有抑制的作用,另外,TTC在高溫滅菌條件下會被嚴(yán)重破壞掉,從而導(dǎo)致染色效果明顯下降。 TTC染色是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的三苯基甲臜(TTF),用來表示細(xì)胞的活力或者計數(shù)。存放或染色時要避光,37度條件下。
用途:用作分析試劑和色譜分析試劑。
一.殘留量檢測
添加量:4%
配制方法:稱取1gTTC,溶于5mL滅菌蒸餾水中,裝褐色瓶內(nèi)于7℃冰箱保存,臨用時用滅菌蒸餾水稀釋至5
倍。如遇溶液變?yōu)橛裆虻稚?則不能再用。
判斷標(biāo)準(zhǔn):觀察時要迅速,避免光照過久發(fā)生干擾。乳中有抗生素存在,則檢樣中雖加菌液培養(yǎng)物,但因細(xì)菌的繁殖受到抑制,因此指示劑TTC不還原,不顯色。與此相反,如果沒有抗生素存在,則加入菌液即行增殖,TTC被還原,顯紅色,也就是說檢樣呈乳的原色時為陽性,呈紅色為陰性。
二.菌落總數(shù)檢測
添加方法:1%,1L培養(yǎng)基加1mL1%的TTC溶液。
添加方法:
方法(一) 在微生物培養(yǎng)結(jié)束后,向培養(yǎng)基表面噴灑1%TTC溶液適量,繼續(xù)培養(yǎng)1~2小時后計數(shù)。注意TTC溶液是不需要無菌的,因?yàn)?小時之內(nèi)是不可能生長出肉眼可見菌落的。
方法(二) 在培養(yǎng)基滅菌后、使用前添加TTC溶液,然后再培養(yǎng)觀察。
作用:TTC能使菌落顯紅色,易于區(qū)分菌落和樣品固態(tài)殘渣,方便計數(shù)。
三.測定種子活力
添加量:0.5%
使用方法:
1. 浸泡 將待測種子在 30 ~ 35 ℃溫水中浸種(大麥、小麥 6 小時,玉米 5 小時左右),以增強(qiáng)種胚的呼吸作用。
2. 顯色 取吸脹的種子 200 粒,用刀片沿種子胚的中心線縱切為兩半,將其中的一半置于 2 只培養(yǎng)皿中,每皿 100 個半粒,加入適量的 0.5% TTC 溶液,以覆蓋種子為度。然后置于 30 ℃恒溫箱中 1 h 。觀察結(jié)果,凡胚被染為紅色的是活種子。 將另一半在沸水中煮 5 min 殺死胚,作同樣染色 |
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