熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
熒光定量PCR 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn),已成為國際公認(rèn)的核酸分子定量的標(biāo)準(zhǔn)方法,目前在基因表達(dá)研究和臨床疾病檢測等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用,常州百代生物使用SYBR Green法或者Taqman 法對 DNA/RNA 進(jìn)行定量測定或型的鑒定。
SYBR Green熒光染料法:適用于任何DNA,無需設(shè)計(jì)探針,采取雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法,實(shí)驗(yàn)周期短,結(jié)果重復(fù)性好,靈敏度高。
TaqMan熒光探針法:經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員設(shè)計(jì)探針,對目標(biāo)基因有高特異性,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好,相對于SYBR Green法,靈敏度更高。
服務(wù)流程
1、根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物或熒光探針
2、提取樣品 DNA/ RNA、電泳、反轉(zhuǎn)錄
3、熒光定量PCR,進(jìn)行擴(kuò)增曲線、溶解曲線、表達(dá)量差異分析等實(shí)驗(yàn)
4、實(shí)驗(yàn)完成后,提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實(shí)驗(yàn)材料
熒光定量PCR服務(wù)要求:
1. 請您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的RNA提取量請參照“總 RNA 的提取”),或直接提供純化好的總RNA(大于5 ug/樣品);(各種材料的DNA提取量請參照“DNA的提取”),或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品) 。
2. 請通過E-mail提供已知的全長基因序列。
3. 請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA來源 、豐度等
樣品類型 細(xì)胞 組織 全血 血漿 RNA DNA
樣品*少量 106 100mg 500ul 500ul 5ug 5ug
推薦保護(hù)劑 Trizol Trizol 肝素 檸檬酸 Rnase-Free水 無
運(yùn)輸條件 液氮/干冰 干冰 干冰 干冰 干冰 冰袋
熒光定量PCR操作程序:
1. 根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針。
2. 提取DNA/RNA 。
3. Real Time PCR(熒光定量PCR),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
4. 實(shí)驗(yàn)完成后,提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實(shí)驗(yàn)材料 |
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