泰特儀器液相色譜儀樣品檢測要點
    液相色譜儀是一種精度極高的檢測儀器,在環境、食品、生物、醫藥行業都有廣泛的應用。本文簡單介紹在液相色譜儀檢測分析樣品的幾個要點。
    流動相比例調整:我國藥品標準中沒有規定色譜柱的長度及填料的粒度,因此每次檢測一個新樣品時都須重新調整流動相,所以建議第一次檢驗樣品時配備適量的流動相即可,以免浪費。制備流動相的標準,主峰一般應調至保留時間為6~15分鐘為宜。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到,應當注意充分平衡色譜柱。    
    樣品配制:樣品溶液從待檢測樣品原料中提取出來之后,須經氮吹儀提純結晶之后配置成一定濃度的溶液,再使用溶劑過濾器進行過濾處理,方可進入儀器。除此之外,盛放溶液的溶劑避免使用塑料材質,塑料容器常含有高沸點的增塑劑,可能釋放到樣品液中造成污染,而且還會吸留某些藥物,引起分析誤差。某些堿性藥物會被玻璃容器表面吸附,影響樣品中藥物的定量回收,因此必要時應將玻璃容器進行硅烷化處理。
    進樣量:檢測樣品的進樣量一般為10L,主要根據定量環的規格而定,目前多數HPLC系統采用定量環規格有10L、20L和50L,因此應注意進樣量是否一致。
    記錄時間:樣品進入色譜柱后,第一次測定時,應先將空白溶劑、對照品溶液及供試品溶液各進一針,并盡量收集較長時間的圖譜(30分鐘以上),以便確定樣品中被分析組分峰的位置、分離度、理論板數及是否還有雜質峰在較長時間內才洗脫出來,確定是否會影響主峰的測定。
    計算:檢測結果的計算主要根據色譜圖,色譜圖是色譜儀定性定量分析的依據。色譜圖的橫軸表示保留時間,可以作為色譜儀器實現定性分析的依據;色譜峰上的極大值是定性分析的依據,而色譜峰所包羅的面積則取決于對應組分的含量,定量分析的依據。需要注意的是,由于有些對照品標示含量的方式與樣品標示量不同,有些是復合鹽、有些含水量不同、有些是鹽基不同或有些是采用有效部位標示,檢驗時須注意。
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