250X4.6mm色譜柱價(jià)格/供應(yīng)多肽色譜柱廠家
色譜柱的清潔與再生
VYDAC®蛋白質(zhì)/肽反相色譜柱可能會(huì)因?yàn)楸晃侥芰?qiáng)的樣品成分污染而導(dǎo)致柱性能下降。如
果前面所給的建議方法不能解決問(wèn)題,那么試試如下方法:
1. 注射1%SDS溶液*多達(dá)該色譜柱體積的12%(對(duì)于4.6mm×250mm規(guī)格色譜柱約為500µL)。然后用含有0.1%(v/v)TFA的5%到95%的乙腈進(jìn)行20分鐘的梯度洗脫。
2. 如果是脂類物質(zhì)或疏水性極強(qiáng)的小分子物質(zhì)導(dǎo)致了柱性能的變化,我們建議您用數(shù)倍于柱
體積的溶劑按如下順序沖洗該色譜柱:乙腈(10個(gè)柱體積),二氯甲烷(10個(gè)柱體積),正己烷(10
個(gè)柱體積),二氯甲烷(10個(gè)柱體積),乙腈(10個(gè)柱體積)
3. 如果色譜柱性能的損失源于蛋白質(zhì)吸附,對(duì)于任何聚合式鍵合相我們建議可使用0.1N硝酸/異丙醇
(1:4)的混合液來(lái)沖洗該色譜柱。低流速(普通流速的20%)的隔夜沖洗是*有效的。
注意:硝酸清洗 不建議用于238TP, 238MS和238EV的“單點(diǎn)式、單點(diǎn)式""鍵合鍵合反相色譜、反相色譜柱。
4. 使用6M的鹽酸胍水溶液。先過(guò)濾胍溶液,然后與異丙醇1:1混合。注射5%柱體積(對(duì)于一個(gè)4.6×250mm的分析柱,注射200µL),然后運(yùn)行異丙醇:水 1:1沖洗該柱。這樣能夠得到一個(gè)胍溶液組成的“塞流",能夠打碎松脫柱內(nèi)牢固附著的蛋白質(zhì)物污染物。
5. 合成肽:從固相樹(shù)脂上裂解下合成肽會(huì)產(chǎn)生具有高反應(yīng)活性的碳正離子而需要用苯甲醚和
茴香硫醚來(lái)“打掃"清除。而這些清除正碳離子的反應(yīng)產(chǎn)生大量的、可溶于有機(jī)溶劑的
芳香性化合物分子出現(xiàn)在“打掃"溶液中。用100%乙腈或者100%甲醇清洗色譜柱可能
無(wú)法將這些分子清洗干凈。又或者,有時(shí),用這些有機(jī)溶劑清洗色譜柱可以除去一些這樣
的污染物,但是會(huì)產(chǎn)生蠟狀沉淀物,有時(shí)會(huì)被誤認(rèn)為柱內(nèi)的C18鍵合相流失。要進(jìn)行清除:用異丙醇
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