E1/E2/E3雌激素ELISA檢測試劑盒
RNH94002
一、試劑盒特征
ES單克隆抗體特異地與E1,E2,E3結合,和其它結構相類似的化學物質不發生交叉反應。單克隆抗體質量穩定每批次間幾乎沒有變化。
定量檢測范圍0.05ug/L–3ug/L(ppb)。
操作簡單,整個過程僅花費2.5小時。
這個試劑盒有很高的重復性,變異系數在10%之內。
需要很少的樣品就可以檢測。
試劑盒的形式是96孔微孔板,可以同時檢測多個樣品,花費合理。
二、檢測原理(競爭ELISA)
1.競爭性反應
這個檢測方法依靠ES單克隆抗體來識別E1,E2,E3。樣品中的ES和一個E2-酶結合物預先混合然后加入到每個微孔中競爭與包被在微孔表面的ES特異性抗體結合。樣品中ES的濃度如果高于E2-酶結合物,ES將主要與抗體結合。反之樣品中ES的濃度如果低于于E2-酶結合物,E2-酶結合物將主要與抗體結合。
2.顯色反應
通過洗滌步驟去除沒有反應的ES和過量的E2-酶結合物。和微孔板中抗體結合的E2-酶結合物催化底物發生反應產生有色物質。通過一個孵育期用稀酸終止反應。樣品中ES的濃度越高導致結合到微孔板抗體上的E2-酶結合物越少,從而產生的顏色越淡,吸光度越低。
3.定量分析
利用已知的E2標準的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應曲線(標準曲線)。把樣品的吸光度值用內插法插入到標準曲線中可以精確的計算出樣品中ES的濃度。 |
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