E1/E2/E3雌激素ELISA檢測試劑盒
RNH94002
一、試劑盒特征
ES單克隆抗體特異地與E1,E2,E3結(jié)合，和其它結(jié)構(gòu)相類似的化學(xué)物質(zhì)不發(fā)生交叉反應(yīng)。單克隆抗體質(zhì)量穩(wěn)定每批次間幾乎沒有變化。
定量檢測范圍0.05ug/L–3ug/L(ppb)。
操作簡單，整個(gè)過程僅花費(fèi)2.5小時(shí)。
這個(gè)試劑盒有很高的重復(fù)性，變異系數(shù)在10%之內(nèi)。
需要很少的樣品就可以檢測。
試劑盒的形式是96孔微孔板，可以同時(shí)檢測多個(gè)樣品，花費(fèi)合理。
二、檢測原理（競爭ELISA）
1.競爭性反應(yīng)
這個(gè)檢測方法依靠ES單克隆抗體來識別E1,E2,E3。樣品中的ES和一個(gè)E2-酶結(jié)合物預(yù)先混合然后加入到每個(gè)微孔中競爭與包被在微孔表面的ES特異性抗體結(jié)合。樣品中ES的濃度如果高于E2-酶結(jié)合物，ES將主要與抗體結(jié)合。反之樣品中ES的濃度如果低于于E2-酶結(jié)合物，E2-酶結(jié)合物將主要與抗體結(jié)合。
2.顯色反應(yīng)
通過洗滌步驟去除沒有反應(yīng)的ES和過量的E2-酶結(jié)合物。和微孔板中抗體結(jié)合的E2-酶結(jié)合物催化底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)。通過一個(gè)孵育期用稀酸終止反應(yīng)。樣品中ES的濃度越高導(dǎo)致結(jié)合到微孔板抗體上的E2-酶結(jié)合物越少，從而產(chǎn)生的顏色越淡，吸光度越低。
3.定量分析
利用已知的E2標(biāo)準(zhǔn)的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應(yīng)曲線（標(biāo)準(zhǔn)曲線）。把樣品的吸光度值用內(nèi)插法插入到標(biāo)準(zhǔn)曲線中可以精確的計(jì)算出樣品中ES的濃度。 |
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