E1/E2/E3雌激素ELISA檢測試劑盒
RNH94002
一、試劑盒特征
ES單克隆抗體特異地與E1,E2,E3結(jié)合,和其它結(jié)構相類似的化學物質(zhì)不發(fā)生交叉反應。單克隆抗體質(zhì)量穩(wěn)定每批次間幾乎沒有變化。
定量檢測范圍0.05ug/L–3ug/L(ppb)。
操作簡單,整個過程僅花費2.5小時。
這個試劑盒有很高的重復性,變異系數(shù)在10%之內(nèi)。
需要很少的樣品就可以檢測。
試劑盒的形式是96孔微孔板,可以同時檢測多個樣品,花費合理。
二、檢測原理(競爭ELISA)
1.競爭性反應
這個檢測方法依靠ES單克隆抗體來識別E1,E2,E3。樣品中的ES和一個E2-酶結(jié)合物預先混合然后加入到每個微孔中競爭與包被在微孔表面的ES特異性抗體結(jié)合。樣品中ES的濃度如果高于E2-酶結(jié)合物,ES將主要與抗體結(jié)合。反之樣品中ES的濃度如果低于于E2-酶結(jié)合物,E2-酶結(jié)合物將主要與抗體結(jié)合。
2.顯色反應
通過洗滌步驟去除沒有反應的ES和過量的E2-酶結(jié)合物。和微孔板中抗體結(jié)合的E2-酶結(jié)合物催化底物發(fā)生反應產(chǎn)生有色物質(zhì)。通過一個孵育期用稀酸終止反應。樣品中ES的濃度越高導致結(jié)合到微孔板抗體上的E2-酶結(jié)合物越少,從而產(chǎn)生的顏色越淡,吸光度越低。
3.定量分析
利用已知的E2標準的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應曲線(標準曲線)。把樣品的吸光度值用內(nèi)插法插入到標準曲線中可以精確的計算出樣品中ES的濃度。 |
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