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廣州維伯鑫生物科技股份有限公司
| 聯(lián)系人：戴老師
女士 (銷售代表) |
| 電 話：020-66377266 |
手 機(jī)：13539886748  |
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| 慢病毒包裝 |
在有關(guān)轉(zhuǎn)染的研究中，為了感染原代細(xì)胞和難感染的細(xì)胞系，研究者借助于病毒載體實現(xiàn)。由于慢病毒可以同時感染分裂和非分裂細(xì)胞、整合性以及免疫原性低等優(yōu)點，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒構(gòu)建的shRNA被最廣泛的使用。而在RNAi研究需要長期觀察或者需要進(jìn)行動物實驗時，基于慢病毒構(gòu)建的shRNA的優(yōu)勢更為明顯。 我們能夠為您提供包括RNAi靶序列設(shè)計、慢病毒載體構(gòu)建、測序、慢病毒生產(chǎn)等一站式服務(wù)。
◇ 服務(wù)內(nèi)容和流程：
1）根據(jù)目的基因相關(guān)信息（序列，序列號等），對每條目的設(shè)計3條siRNA序列，其中一條序列為陰性對照組；
2）根據(jù)設(shè)計好的 siRNA序列，設(shè)計，合成兩條互補(bǔ)的短片段的DNA；
3）對合成好的 DNA片段進(jìn)行稀釋，退火，連接到線形化處理過的載體，轉(zhuǎn)化，涂平板，過夜培養(yǎng)；
4）通過 PCR的方法篩選陽性菌落，進(jìn)行測序，分析測序結(jié)果；
5）對于測序正確的重組質(zhì)粒，提取和純化高質(zhì)量的不含內(nèi)毒素的 siRNA病毒穿梭質(zhì)粒；
6）利用構(gòu)建好的質(zhì)粒做轉(zhuǎn)染實驗， 48小時后通過實時熒光定量和Western的方法分析目的基因，篩選出一條最有效的siRNA序列；
7）篩選出的高效重組載體和病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染 293T細(xì)胞，進(jìn)行病毒包裝和生產(chǎn)，收集病毒液；
8）濃縮、純化病毒液，測定滴度。
◇ 您只需提供：
靶基因信息。
◇ 我們提供：
慢病毒包裝的實驗報告單，含實驗材料方法和結(jié)果，
提供108TU/ml病毒（1ml）和對照病毒。
◇ 實驗周期：6-7周。
◇ 收費標(biāo)準(zhǔn)：詢價。 |
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