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智立中特(武漢)生物科技有限公司
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| BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞zlzt細胞庫 |
一、BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞
產品類別：其它動物細胞系
生長特性：貼壁生長
培養體系：DMEM+10%FBS
細胞形態：成纖維細胞樣
BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞培養步驟
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養液收集至離心管中，留5ml完全培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養，傳代具體步驟如下：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上完全培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養基重懸。
4.將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養基至5-8ml/瓶，*后放入到37℃、5%CO2的細胞培養箱中培養。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄T25培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉入液氮罐中，則需在-80℃冰箱中存放24小時以上再轉入液氮罐中。
C、細胞復蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶 |
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