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科研試劑 美國(guó)Biostone多物種布魯氏菌(布病)抗體(cELISA)

詳細(xì)說(shuō)明

    一、概述

試劑盒用于檢測(cè)豬牛羊血清和牛奶中流產(chǎn)型布氏桿菌,馬耳他布魯氏菌,綿羊附睪種布魯氏菌和豬種布魯氏菌的抗體。試劑盒原理是基于cELISA方法,酶標(biāo)板上已經(jīng)包被純化的布魯氏菌抗原,樣品和酶標(biāo)抗體加入后,如果樣品含有布魯氏菌抗體,能與板上包被抗原特異性結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物,并阻斷的酶標(biāo)抗體與板上包被抗原結(jié)合。能結(jié)合在板上的酶標(biāo)抗體的酶再催化底物顯色,顯色深度與樣品中的抗體含量成反比關(guān)系。



二、試劑盒規(guī)格及組分

【試劑盒組分】 【10043-02】【10043-05】【儲(chǔ)存溫度】

【抗原包被板 Brucella antigen-Coated Plate】【2*96】【5*96】【4°C】

【陽(yáng)性對(duì)照(紅蓋) Brucella Positive Control】【1.8mL】【2*1.8mL】【4°C】

【陰性對(duì)照(白蓋)Brucella Negative Control】【1.8mL】【2*1.8mL 】【4°C】

【酶標(biāo)抗體Anti-Brucella Antibody-HRP Conjugate】【1瓶】【2瓶】【4°C】

【10X稀釋液10X Diluent Solution 】 【12mL】【28mL】【4°C】

【20X洗板液 20X Wash Solution】 【56mL】【120mL】【4°C】

【TMB底物 TMB Substrate】 【24mL】【58mL】【4°C】

【終止液 Stop Solution】 【24mL】【58mL】【4°C】

備注:如果試劑盒超過(guò)一個(gè)月不使用建議陰陽(yáng)性對(duì)照和酶標(biāo)抗體在-20°C儲(chǔ)存。



三、試劑以及樣品制備

1X稀釋液:用9體積的蒸餾水稀釋1體積的10X稀釋液,得到1X稀釋液。

1X洗板液:用19體積的蒸餾水稀釋1體積的20X洗板液,得到1X洗板液。

酶標(biāo)物(凍干粉):先加160ul 1X的稀釋液溶解為100X的濃縮液,然后再用1X的稀釋液按照檢測(cè)用量稀釋100倍后使用,例如60ul 100x的濃縮液:5940ul 1x的稀釋液混勻后足夠1板試劑盒的用量。備注:復(fù)溶后的100x酶標(biāo)物保存于2-8°C的有效期為三個(gè)月,保存于-20°C的有效期為一年。

小反芻動(dòng)物血清(山羊,綿羊)預(yù)稀釋?zhuān)涸谘逑♂尠迳鲜褂?X稀釋液將樣品血清稀釋5倍,例如將40uL的血清加入到160uL的1X稀釋液中混勻,備用。

;蛘哓i血清預(yù)稀釋?zhuān)涸谘逑♂尠迳鲜褂?X稀釋液將樣品血清稀釋10倍,例如將20uL的血清加入到180uL的1X稀釋液中混勻,備用。

牛奶樣品:在血清稀釋板上使用1X稀釋液將樣品血清稀釋2倍,例如將100uL的牛奶加入到100uL的1X稀釋液中混勻,備用。



四、實(shí)驗(yàn)操作

【試劑】 【每孔用量】

【樣品/對(duì)照】 【50uL】

【酶標(biāo)抗體】 【50uL】

【1X洗板液】 【2mL】

【底物】 【100uL】

【終止液】 【100uL】



1.實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出回復(fù)室溫;

2.設(shè)置好對(duì)照

 
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