硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑是一種廣效性抗生素,因價(jià)格較低廉且療效佳,廣泛用于畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類,用以治療由大腸桿菌或沙門氏桿菌所引起之腸炎,養(yǎng)殖魚之癤瘡、赤鰭病、潰瘍病等,于飼料中添加或養(yǎng)殖藥浴使用。由于硝基呋喃類抗菌劑及其代謝物對(duì)人體長(zhǎng)期食入有致癌、致畸胎及安全之顧慮,1995
年起歐盟 (European Union) 禁止硝基呋喃類抗菌劑在食用之畜禽及水產(chǎn)動(dòng)物使用,并嚴(yán)格執(zhí)行對(duì)輸入之食用魚、蝦及禽類進(jìn)行硝基呋喃的殘留檢測(cè),2002 年美國(guó)亦起而效尤。
硝基呋喃類抗菌劑原型藥在生物體內(nèi)代謝迅速,無法偵測(cè);而其代謝物因和蛋白質(zhì)結(jié)合而相當(dāng)安定,故利用代謝物的檢測(cè)可反應(yīng)硝基呋喃類抗菌劑的殘留狀況。硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑常見有以下四種藥物-呋喃唑酮 (Furazolidone)、呋喃它酮(Furaltadone)、呋喃西林(Nitrofurazone) 和 呋喃妥因
( Nitrofurantoi ) 。代謝物分別為AOZ ( 3-amino-2-oxazolidinone ) 、AMOZ
(3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone)、SEM(semicarbazide)、AHD (1-aminohydantoin)。
目前普遍利用LC-UV、LC-MS、LC-MS/MS進(jìn)行SEM的殘留檢測(cè),相較于高成本的儀器分析,酵素免疫檢驗(yàn)法可提供一經(jīng)濟(jì)、便利、低成本且大量初篩的檢測(cè)。本公司研發(fā)之呋喃西林(Nitrofurazone) 代謝物-SEM酵素免疫檢驗(yàn)試劑套組,經(jīng)16小時(shí)的衍生及萃取步驟,ELISA分析部分不到1小時(shí)即可完成檢測(cè)。魚肉、蝦肉、生乳、蜂蜜之靈敏度可達(dá)0.2 ppb,雞肉之靈敏度可達(dá)0.4 ppb。
試劑內(nèi)容:
1、 微量測(cè)試孔盤 (Microtiter well plate):微量測(cè)試孔盤:每條8 孔,一盤12 條
2、 SEM 標(biāo)準(zhǔn)溶液(SEM standard): 0 ppb, 0.05 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb, 0.9 ppb, 8.1 ppb 各一瓶,1.5 mL / 瓶
3、10倍濃縮萃取/清洗液 (10× Conc. Extraction / Washing solution):一瓶,50 mL / 瓶
4、10倍濃縮緩沖液 (10× Conc. Buffer) :一瓶,50 mL / 瓶
5、5倍濃縮脢標(biāo)記物稀釋液 (5× Conc. Enzyme Conjugate Diluent ) :一瓶,2 mL / 瓶
6、衍生試劑 (Derivative reagent) :一瓶,12 mL / 瓶
7、濃縮脢標(biāo)記物(SEM Conjugate (Conc.)):一瓶,150 μL / 瓶 (需保存于2 ~ 8 ℃)
8、底物溶液 (Substrate solution,TMB) :一瓶,12 mL / 瓶
9、反應(yīng)終止液 (Stop solution) :一瓶,13 mL / 瓶
特異性 (Specificity)
針對(duì)以下硝基呋喃類抗菌劑進(jìn)行特異性交叉反應(yīng)測(cè)試,結(jié)果如下:
Compound Cross-Reactivity(%)
3-amino-2-oxazolidinone (AOZ) < 0.01 %
3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone (AMOZ) < 0.01 %
1-aminohydantoin(AHD) < 0.01 %
檢品敏感度(Sensitivity)
各類檢體之檢測(cè)敏感度如下:
檢品 敏感度(ppb)
魚、蝦、生乳、蜂蜜 0.2
雞肉 0.4
回收率(Recovery rate)
檢品 回收率(%)
魚、蝦、生乳、雞肉 80 ~ 120
蜂蜜 70 ~ 130 |
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