硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑是一種廣效性抗生素,因價格較低廉且療效佳,廣泛用于畜禽及水產養殖魚類,用以治療由大腸桿菌或沙門氏桿菌所引起之腸炎,養殖魚之癤瘡、赤鰭病、潰瘍病等,于飼料中添加或養殖藥浴使用。由于硝基呋喃類抗菌劑及其代謝物對人體長期食入有致癌、致畸胎及安全之顧慮,1995 年起歐盟 (European Union) 禁止硝基呋喃類抗菌劑在食用之畜禽及水產動物使用,并嚴格執行對輸入之食用魚、蝦及禽類進行硝基呋喃的殘留檢測,2002 年美國亦起而效尤。硝基呋喃類抗菌劑原型藥在生物體內代謝迅速,無法偵測;而其代謝物因和蛋白質結合而相當安定,故利用代謝物的檢測可反應硝基呋喃類抗菌劑的殘留狀況。硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑常見有以
下四種藥物-呋喃唑酮 (Furazolidone)、呋喃它酮(Furaltadone)、呋喃(Nitrofurazone) 和 呋喃妥因( Nitrofurantoi ) 。代謝物分別為AOZ ( 3-amino-2-oxazolidinone ) 、AMOZ(3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone)、SEM(semicarbazide)、AHD (1-aminohydantoin)。
目前普遍利用LC-UV、LC-MS、LC-MS/MS進行AMOZ的殘留檢測,相較于高成本的儀器分析,酵素免疫檢驗法可提供一經濟、便利、低成本且大量初篩的檢測。本公司研發之呋喃它酮(Furaltadone) 代謝物-AMOZ酵素免疫檢驗試劑套組,經16小時的衍生及萃取步驟,ELISA分析部分不到1小時即可完成檢測。各檢品蝦肉、魚肉、雞肉、全蛋、生乳、蜂蜜之靈敏度可達0.1 ppb。
試劑內容:
1、微量測試孔盤(Microtiter well plate):微量測試孔盤:每條8孔,一盤12條
2、2-NP-AMOZ標準品溶液(只計算AMOZ實際含量):0 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.25 ppb、0.5 ppb、1 ppb 各一瓶,1.0 mL / 瓶
3、10倍濃縮萃取/清洗液(10× Conc. Extraction / Washing solution):一瓶,50 mL / 瓶
4、10倍濃縮緩沖液(10× Conc. Buffer):一瓶,50 mL / 瓶
5、衍生試劑(Derivative reagent):一瓶,12 mL / 瓶
6、100倍 AMOZ 濃縮脢標記物(100x AMOZ conjugate):一瓶,100 μL / 瓶
7、底物溶液(Substrate solution,TMB):一瓶,12 mL / 瓶
8、反應終止液(Stop solution):一瓶,13 mL / 瓶
特異性 (Specificity)
針對以下硝基呋喃類抗菌劑進行特異性交叉反應測試,結果如下:
Compound Cross-Reactivity(%)
2-NP-(3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone)
(2-NP-AMOZ)
100%
3-amino-2-oxazolidinone ( AOZ ) < 0.05 %
Semicarbazide(SEM) < 0.05 %
1-aminohydantoin(AHD) < 0.05 %
檢品檢測極限 ( Detection Limit)
各類檢體之檢測敏感度如下:
檢品 檢測極限(ppb)
蝦、魚、雞肉、全蛋、生乳、蜂蜜 0.1
回收率(Recovery Rate)
檢品(外加AMOZ 濃度) 回收率(%)
蝦、魚、雞肉、生乳、蜂蜜 75 ~ 115
全蛋 60~70 |
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