硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑是一種廣效性抗生素,因價格較低廉且療效佳,廣泛用于畜禽及水產養殖魚類,用以治療由大腸桿菌或沙門氏桿菌所引起之腸炎,養殖魚之癤瘡、赤鰭病、潰瘍病等,于飼料中添加或養殖藥浴使用。由于硝基呋喃類抗菌劑及其代謝物對人體長期食入有致癌、致畸胎及安全之顧慮,1995 年起歐盟
(European Union) 禁止硝基呋喃類抗菌劑在食用之畜禽及水產動物使用,并嚴格執行對輸入之食用魚、蝦及禽類進行硝基呋喃的殘留檢測,2002 年美國亦起而效尤。
硝基呋喃類抗菌劑原型藥在生物體內代謝迅速,無法偵測;而其代謝物因和蛋白質結合而相當安定,故利用代謝物的檢測可反應硝基呋喃類抗菌劑的殘留狀況。硝基呋喃類 (Nitrofurans) 抗菌劑常見有以下四種藥物-呋喃唑酮(Furazolidone)、呋喃
它酮(Furaltadone)、呋喃西林 (Nitrofurazone) 和呋喃妥因 (Nitrofurantoin)。代謝物分別為AOZ ( 3-amino-2-oxazolidinone ) 、AMOZ( 3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone ) 、SEM ( semicarbazide ) 、AHD
(1-aminohydantoin)。目前普遍利用LC-UV、LC-MS、LC-MS/MS進行AOZ的殘留檢測,相較于高成本的儀器分析,酵素免疫檢驗法可提供一經濟、便利、低成本且大量初篩的檢測。本公司研發之呋喃唑酮 (Furazolidone)代謝物-AOZ酵素免疫檢驗試劑套組,經16小時的衍生及萃取步驟,ELISA分析部分不到1小時即可完成檢測。魚肉、蝦肉、生乳、蜂蜜之靈敏度可達0.1 ppb,雞肉之靈敏度可達0.05 ppb,飼料、魚粉之靈敏度可達0.3 ppb。
試劑內容:
1、微量測試孔盤 (Microtiter well plate):微量測試孔盤:每條8孔,一盤12條
2、AOZ標準溶液 (AOZ standard) : 0 ppb、0.025 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、
0.2 ppb、0.5 ppb 各一瓶,1.5 mL / 瓶
3、10倍濃縮萃取/清洗液 (10× Conc. Extraction / Washing solution):一瓶,50 mL / 瓶
4、10倍濃縮緩沖液 (10× Conc. Buffer) :一瓶,50 mL / 瓶
5、衍生試劑 (Derivative reagent) :一瓶,12 mL / 瓶
6、濃縮脢標記物 (AOZ Conjugate (Conc.)):一瓶,150 μL / 瓶 (需保存于2 ~ 8 ℃)
7、底物溶液(Substrate solution,TMB) :一瓶,12 mL / 瓶
8、反應終止液 (Stop solution) :一瓶,13 mL / 瓶
特異性 (Specificity)
針對以下硝基呋喃類抗菌劑進行特異性交叉反應測試,結果如下:
Compound Cross-Reactivity(%)
3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone(AMOZ) < 0.1 %
Semicarbazide(SEM) < 0.1 %
1-aminohydantoin(AHD) 0.5 %
檢品敏感度(Sensitivity)
各類檢體之檢測敏感度如下:
檢品 敏感度(ppb)
魚、蝦、生乳、蜂蜜 0.1
雞肉 0.05
飼料、魚粉 0.3
回收率(Recovery rate)
檢品 回收率(%)
魚、蝦、雞肉、生乳、飼料、魚粉 80 ~ 120
蜂蜜 70 ~ 130 |
 |
|