孔雀石綠(malachite green; MG) 是一種工業用三苯甲烷
(triphenylmehtane)類染料，由于具有抗霉菌及抗格蘭氏陽性菌之功效，且價格便宜，所以被廣泛運于用養殖漁業之病害防治；當養殖水含有孔雀石綠時，魚體會快速吸收孔雀石綠進而代謝成為還原型孔雀石綠(Leucomalachitereen; LMG) 而囤積在肌肉中長達數月。近年來有關此類染料的毒理研究發現：孔雀石綠及其主要代謝物還原型孔雀石綠具有多重毒性，包括致癌性、致基因
突變、引起染色體斷裂、致畸胎及呼吸道毒性。
依照歐盟標準，魚肉中所殘留之孔雀石綠與還原型孔雀石綠之總合不得超過2ppb (每公斤2微毫克)。現行分析孔雀石綠類的方法有LC-MS及 HPLC，但是這些方法都需要較貴重之儀器及藥品，且需要較長的時間或特需訓練的人員方可進行分析測試。因此本公司推出了孔雀石綠類酵素免疫檢驗試劑套組，提供一個分析快速、價錢合理且擁有高敏感度之分析方法。
本公司所推出之孔雀石綠類酵素免疫檢驗試劑套組可直接檢測最小值為0.2ppb之還原型孔雀石綠；或是在使用還原劑后，對相同當量的孔雀石綠進行檢測，并對同屬三苯甲烷類的結晶紫(Crystal violet; CV)及還原型結晶紫(Leucocrystal Violet; LCV)產生交叉反應，且對幾種常用之抗生素及磺胺藥類皆無交叉反應。這款免疫檢驗試劑可用在針對水產內所殘留的孔雀石綠進行
測試；試劑判讀之cut-off訂為0.4ppb，檢體之檢測值大于0.4ppb 可判為陽性檢體，檢測值小于0.4ppb則可判為陰性檢體。我們仍然建議所有的陽性檢體必須由LC-MS做確認分析。
試劑內容
1、 微量測試孔 （microtiter wells）：
微量測試孔：每條8孔，一盤12條
2、 還原型孔雀石綠標準溶液 （LMG standards）：
0 ppb、0.2 ppb、0.5 ppb、1 ppb、2.5 ppb、5 ppb各一瓶，
1 mL / 瓶
3、 樣品稀釋液 （Sample Diluent）：一瓶，50 mL / 瓶
4、 10倍濃縮清洗液 （10X Washing Solution）：一瓶，50 mL / 瓶
5、 還原型孔雀石綠10倍濃縮抗體 （LMG Antibody (10X)）： 一瓶，1.3 mL
/ 瓶
6、 還原型孔雀石綠抗體稀釋液 （LMG Antibody Diluent）：一瓶，13 mL
/ 瓶
7、 10倍濃縮二次抗體（Tracer (10X)）：一瓶，1.2 mL / 瓶
8、 二次抗體稀釋液 (Tracer Diluent）：一瓶，13 mL / 瓶
9、 底物溶液（Substrate solution；TMB）：一瓶，12 mL / 瓶
10、 反應終止液 （Stop Solution）：一瓶，13 mL / 瓶
11、 還原劑（Reductant）：一瓶，1g / 瓶
特異性（Specificity）
針對下列藥品以1 ppm之濃度與還原型孔雀石綠(LMG)進行交叉反應試驗，發現
并沒有明顯的交叉作用存在。
Clenbuterol Sulfadiazine Sulfaquinoxaline
Salbutamol Sulfamonomethoxine Sulfamethoxazole
Terbutaline Sulfamethazine Sulfanitran
Chloramphenicol Sulfamethoxypyridazine Penicillin G
Gentamicin Sulfadimethoxine Tetracycline
Oxytetracycline Sulfathiazole
Aromatic compounds (aniline, dimethylaniline, benzaldehyde)
而對于同屬三苯甲烷類的其它染劑類藥品，交叉反應結果為：
藥品名稱 還原前交叉反應率(%) 還原后交叉反應率(%)
還原型孔雀石綠(LMG) 100% 100%
孔雀石綠(MG) 30% 100%
結晶紫(CV) 10% 200%
還原型結晶紫(LCV) 200% 200%
檢品敏感度（Sensitivity）
各類檢體之檢測敏感度如下：
檢品 敏感度（ppb）
魚類、蝦 0.2
回收率（Recovery rate）
魚類 80-110%
蝦 70-100% |
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