His 標簽蛋白(競爭法)快速檢測試劑盒是基于膠體金側向層析技術的蛋白半定量檢測
試劑。主要結構由樣品墊、金標墊、層析膜、吸水紙、背板等組成。在層析膜上固定有金標
抗體的二抗(質控線)和帶有 His-tag 的蛋白(檢測線);在金標墊上固定有膠體金標記的
抗 His-Tag 的單克隆抗體。當待測樣品滴加到樣品墊時,通過毛細作用,液體向金標墊移動。
當不含有 His-Tag 蛋白的待測樣品通過金標墊時,His-Tag 金標抗體隨著層流移動到檢測線
位置,與固定在檢測線上的帶有 His-tag 的蛋白發生特異性結合,并在檢測線上形成酒紅色
條帶;當含有 His-Tag 蛋白的待測樣品通過金標墊時,His-Tag 金標抗體與待測樣本中的
His-Tag 蛋白發生特異性的結合,樣本中含有的 His-Tag 蛋白越多,與之結合的金標 His-Tag
抗體越多,剩余的游離 His-Tag 金標抗體越少,隨著層流移動到檢測線位置,游離的 His-Tag
金標抗體與固定在檢測線上的帶有 His-tag 的蛋白發生特異性結合,并在檢測線上形成淡淡
的酒紅色條帶或者不顯帶。當復合物移動到質控線時,His-Tag 金標抗體被包被在質控線的
金標抗體二抗所捕獲,并在質控線上形成酒紅色條帶。通過判讀層析膜上檢測線和質控線是
否顯色及顯色的強弱,判斷樣品中是否存在 His-Tag 蛋白。本試劑檢測下限為10ug/mL,即
當待測樣品中 His-Tag 蛋白的濃度達到10ug/ml 及以上濃度時,檢測線的強度會被有效的削
弱,顯示出淡淡的酒紅色條帶或不顯色。當檢測樣品中 His-Tag 蛋白濃度在10ug/mL 至
100ug/mL 時,檢測線顏色的深淺與樣品中 His-Tag 蛋白的濃度呈負相關。當樣本中的 His-Tag
蛋白濃度達到100ug/ml 以上時,檢測線發生消線即無肉眼可見條帶出現 |
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