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BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞zlzt細胞庫 BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞zlzt細胞庫//BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞zlzt細胞庫

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公 司: 智立中特(武漢)生物科技有限公司 
發布時間:2024年06月04日
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公 司:智立中特(武漢)生物科技有限公司

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詳細說明

      一、BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞

  產品類別:其它動物細胞系

  生長特性:貼壁生長

  培養體系:DMEM+10%FBS

  細胞形態:成纖維細胞樣

  BSR-T7/5金黃倉鼠腎細胞培養步驟

  a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養液收集至離心管中,留5ml完全培養基,放入37℃、5%CO2孵箱培養;如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養,傳代具體步驟如下:

  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上完全培養基終止消化。

  3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養基重懸。

  4.將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養基至5-8ml/瓶,*后放入到37℃、5%CO2的細胞培養箱中培養。

  b、細胞凍存:

  1、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄T25培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

  2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

  3、棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。

  4、將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉入液氮罐中,則需在-80℃冰箱中存放24小時以上再轉入液氮罐中。

  C、細胞復蘇:

  1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶


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