樣品要求
蛋白樣品-80℃保存，干冰寄送，下單前請先和工作人員溝通，確認(rèn)測試細(xì)節(jié)。
常見問題
1：適配子DNA單鏈，可以用帶有互補(bǔ)鏈的磁珠進(jìn)行pull down嗎？如果可以，效率怎么樣？一般需要怎么優(yōu)化條件？
理論上說,若DNA單鏈能夠與磁珠上的互補(bǔ)鏈雜交成功,是可以進(jìn)行pull down實(shí)驗(yàn)的; 效率如何不好確定,這個(gè)取決于兩條DNA單鏈?zhǔn)欠衲茈s交成功、蛋白-DNA結(jié)合的強(qiáng)弱、蛋白的豐度等。
2：DNA pull down的 原理？
針對目標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)特異性DNA探針并進(jìn)行生物素標(biāo)記，生物素探針可與偶聯(lián)在磁珠上的鏈霉親和素結(jié)合；細(xì)胞蛋白提取物與磁珠-DNA探針孵育，從而釣取與DNA探針有特異性結(jié)合的互作蛋白質(zhì)。
3：你們對外服務(wù)的檢測項(xiàng)目有哪些？
細(xì)胞、動物/植物組織、菌體都可以做DNA pull down, 我們還可以做的檢測實(shí)驗(yàn)具體如下:
(1) RNA-蛋白/RNA互作及定位：RNA pull down、RIP、fish等;
(2) DNA-蛋白互作：DNA pull down、ChIP、EMSA、雙熒光素酶、酵母單雜等;
(3) 蛋白-蛋白互作：GST/his pull down、CoIP、酵母雙雜等;
(4) 細(xì)胞學(xué)檢測：細(xì)胞增殖-MTT/CCK-8, 細(xì)胞凋亡, 細(xì)胞周期,細(xì)胞遷移、侵襲：劃痕愈合/Transwell/Transwell（Matrigel）等;
4：效率有多高？
效率主要取決于蛋白-DNA結(jié)合的強(qiáng)弱、蛋白的豐度等。
5：老師，對照組的DNA序列是怎么選擇的？
一般對照組是沒有探針的,對照組是磁珠beads+蛋白 |
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