一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
重組胰蛋白酶：CAS：9002-07-7；EC：3.4.21.4
重組胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。本產(chǎn)品為重組豬胰蛋白酶，氨基酸序列與豬胰來源的胰蛋白酶完全一致，重組基因工程生產(chǎn)，畢赤酵母表達(dá)。
二、 產(chǎn)品特性
來源：畢赤酵母
性狀：溶液為無色至淡黃色澄清液體；凍干粉為白色或類白色結(jié)晶性粉末。
純度（RP-HPLC）：β-trypsin≥70%，α-trypsin ≤20%
比活：≥3800 USP units/mg pro
宿主蛋白殘留量 ：≤0.01%
外源性DNA殘留量 ：≤ 10 ng/mg
特異性：切割精氨酸和賴氨酸羧基端肽鍵
三、產(chǎn)品用途
重組胰島素及類似物生產(chǎn)；GLP-1及類似物的生產(chǎn); 各種細(xì)胞培養(yǎng)，如疫苗生產(chǎn)，干細(xì)胞的分離等； 重組蛋白、多肽的生產(chǎn); 蛋白類、抗體類藥物的質(zhì)量檢測(cè); 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究，如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序、肽圖譜分析; 某些特殊化合物的酶促合成; 其他小分子蛋白或多肽的生產(chǎn)，如美容肽，抗菌肽、食品風(fēng)味肽的生產(chǎn)等。
四、使用方法
需對(duì)消化不同細(xì)胞的消化時(shí)間、含量、溫度進(jìn)行研究。現(xiàn)以5ml含量0.25%的消化液對(duì)消化vero和bhk-21兩種貼壁細(xì)胞為例，將消化液預(yù)熱至室溫25～30℃，加入經(jīng)培養(yǎng)的致密的單層細(xì)胞消化7.5～10min勻可被消化為小細(xì)胞團(tuán)和單個(gè)細(xì)胞，對(duì)照組、含EDTA組、不含EDTA組細(xì)胞存活率≧93.47%。消化后的細(xì)胞以1:3的比例傳入新的培養(yǎng)瓶中，分別于12h、24h后觀察細(xì)胞狀態(tài)正常。
注意事項(xiàng)：活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如PMSF等影響，金屬離子螯合劑如EDTA等會(huì)抑制酶活；高濃度的無機(jī)鹽對(duì)酶活性會(huì)有一定的影響。
五、存儲(chǔ)穩(wěn)定性
在–15℃條件下凍干粉可穩(wěn)定保存2年，消化液1年。 |
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