馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)的應用!
一、概述
馬鈴薯葡萄糖瓊脂是食用菌母種*常用培養基之一,可用于霉菌,酵母菌計數。配方如下:馬鈴薯200g制成浸出液,葡萄糖20g,瓊脂15〜20g,水1000mL,不調節pH。制備方法如下:取新鮮馬鈴薯200g,洗凈去皮切成小塊,加水煮沸20〜30min(能被玻璃棒戳破即可),然后用四層紗布過濾,再根據需要加入葡萄糖或蔗糖20g和瓊脂15〜20g,繼續加熱攪勻,稍冷卻后補足水分至1000mL制備PDA培養基有時可加入氯霉素或土霉素等抑制細菌的生長,減少干擾。若不加瓊月旨,可用于真菌的液體培養。
二、產品用法
稱取本品 46.0g,加入 1000ml 蒸餾水中,115℃高壓滅菌 20分鐘,備用。滅菌好的培養基僅可重復加熱熔化一次。
三、微生物靈敏度試驗
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置20-25℃需氧培養48-72小時。注:回收率計算時,用SDA 瓊脂做對照培養基。
四、制備
其配方為馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克,水1000毫升。制作時先將馬鈴薯去皮,洗凈,發芽薯塊要挖去芽眼(因芽眼處含龍葵堿,有毒),切成薄片,加水煮沸直至軟而不爛,用8層紗布(經浸濕擰干)過濾取汁。然后將浸水漂洗并擰干的瓊脂加入馬鈴薯液汁中,煮至全部融化,再用紗布過濾,加水補足至1000毫升。*后加葡萄糖攪拌溶化后分裝試管、滅菌。本培養基適用于培養和保藏各種食用菌。
五、應用
CN201110315661提供一種桑黃菌絲體的制備方法。步驟包括:桑黃菌種活化;馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基平板培養;刮取桑黃菌絲體接種于馬鈴薯葡萄糖液體培養基中進行振蕩培養;收集桑黃菌絲體;提取桑黃菌絲體總RNA;瓊脂糖凝膠電泳觀察結果。本發明使用的菌種是保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)桑黃菌種(鮑姆層孔菌,保藏號為桑黃DL101 CCTCC M 2011137)。本發明操作簡單,原理易懂,為今后獲得大規模的、高純度的桑黃菌絲體和高質量的桑黃總RNA提供了簡便快捷的方法,也為桑黃的基礎研究和應用開發奠定了基礎。
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