SKOV3/DDP 百歐博偉細胞系
一、細胞簡介
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養條件:RPMI-1640(Hyclone),90%;優質胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37℃。
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:完全培養基50%+40%FBS+10%DMSO
二、使用方法
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯系。
2.如包裝完好,取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時,以穩定細胞狀態。
3.細胞狀態穩定后,棄除培養瓶中大部分液體,只剩5-10ml左右培養液繼續培養就可以了,超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。
4.細胞傳代
1)吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS 2-3ml清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1.5ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5ml,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
三、注意事項
1.在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;
2.傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;
3.該細胞只可用于科研。
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