脂肪干細胞向神經前體細胞分化的實驗方案一:實驗目的
青島西凱生物技術有限公司于2010年,是一家以干細胞,免疫細胞為核心,結合jing準醫療,致力于“家族生命健康管理”,專注于“干細胞的研發儲存及應用”,設有再生醫學zhong心、綜合性干細胞庫、西凱生物干細胞抗衰美容臨床研究轉化基地和培訓zhong心。
1、誘導脂肪干細胞定向分化為神經前體細胞。
2、流式檢測CD49d,nestin表達量,確定誘導方法。
3、動物:健康成年SD大鼠20只,190-220g,SPF級,雌雄各半。分兩組:一組4只注射生理鹽水,是為空白對照,一組12只尾部靜脈注射,為供試品組,一組4只尾部靜脈注射脂肪干細胞,為陽性對照組。連續飼養30天,觀察誘導獲得的神經前體細胞對大鼠是否有毒副作用。
4、15天每組取2只,以Elisa法檢測血清中bFGF的含量。30天時再取剩余動物,以相同方法檢測。
細胞分組:
分組誘導劑(ng/ml)
組別1 DMEM/F12+10%FBS+3mmol/Lβ-ME+20g/LDMSO+200mmol/L BHA
組別2 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/mbFGF
組別3 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/ml bFGF+100ng/ml NGF
組別4 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/mlbFGF+100ng/mlNGF+200ng/ml GM1
空白對照完全培養基90%DMEM+10%FBS+100U抗sheng素 |
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