一、概述
試劑盒用于檢測豬牛羊血清和牛奶中流產型布氏桿菌，馬耳他布魯氏菌，綿羊附睪種布魯氏菌和豬種布魯氏菌的抗體。試劑盒原理是基于cELISA方法，酶標板上已經包被純化的布魯氏菌抗原，樣品和酶標抗體加入后，如果樣品含有布魯氏菌抗體，能與板上包被抗原特異性結合形成抗原抗體復合物，并阻斷的酶標抗體與板上包被抗原結合。能結合在板上的酶標抗體的酶再催化底物顯色，顯色深度與樣品中的抗體含量成反比關系。
二、試劑盒規格及組分
【試劑盒組分】 【10043-02】【10043-05】【儲存溫度】
【抗原包被板 Brucella antigen-Coated Plate】【2*96】【5*96】【4°C】
【陽性對照（紅蓋） Brucella Positive Control】【1.8mL】【2*1.8mL】【4°C】
【陰性對照（白蓋）Brucella Negative Control】【1.8mL】【2*1.8mL 】【4°C】
【酶標抗體Anti-Brucella Antibody-HRP Conjugate】【1瓶】【2瓶】【4°C】
【10X稀釋液10X Diluent Solution 】 【12mL】【28mL】【4°C】
【20X洗板液 20X Wash Solution】 【56mL】【120mL】【4°C】
【TMB底物 TMB Substrate】 【24mL】【58mL】【4°C】
【終止液 Stop Solution】 【24mL】【58mL】【4°C】
備注：如果試劑盒超過一個月不使用建議陰陽性對照和酶標抗體在-20°C儲存。
三、試劑以及樣品制備
1X稀釋液：用9體積的蒸餾水稀釋1體積的10X稀釋液，得到1X稀釋液。
1X洗板液：用19體積的蒸餾水稀釋1體積的20X洗板液，得到1X洗板液。
酶標物（凍干粉）：先加160ul 1X的稀釋液溶解為100X的濃縮液，然后再用1X的稀釋液按照檢測用量稀釋100倍后使用，例如60ul 100x的濃縮液：5940ul 1x的稀釋液混勻后足夠1板試劑盒的用量。備注：復溶后的100x酶標物保存于2-8°C的有效期為三個月，保存于-20°C的有效期為一年。
小反芻動物血清（山羊，綿羊）預稀釋：在血清稀釋板上使用1X稀釋液將樣品血清稀釋5倍，例如將40uL的血清加入到160uL的1X稀釋液中混勻，備用。
牛或者豬血清預稀釋：在血清稀釋板上使用1X稀釋液將樣品血清稀釋10倍，例如將20uL的血清加入到180uL的1X稀釋液中混勻，備用。
牛奶樣品：在血清稀釋板上使用1X稀釋液將樣品血清稀釋2倍，例如將100uL的牛奶加入到100uL的1X稀釋液中混勻，備用。
四、實驗操作
【試劑】 【每孔用量】
【樣品/對照】 【50uL】
【酶標抗體】 【50uL】
【1X洗板液】 【2mL】
【底物】 【100uL】
【終止液】 【100uL】
1.實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出回復室溫；
2.設置好對照 |
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