描述
雙標簽免疫沉淀/免疫共沉淀試劑盒，包含足夠完成 20 個反應的試劑，每個TAP反應，TST樹脂需要 100μL，flag樹脂需要 50 μL。
儲存條件 收到本產品后flag樹脂和洗脫液于 -20 ℃ 貯存，其他產品于 4 ℃ 貯存。
產品簡介 輝駿生物雙標簽免疫沉淀 /免疫共沉淀試劑盒能夠高效完成單標簽融合蛋白或雙標簽融合蛋白免疫共沉淀實驗。以雙標簽融合蛋白做TAP為例，將Flag標簽、TST標簽與誘餌蛋白在目的細胞中融合表達，*一步用TST樹脂來粗調取誘餌蛋白的互作蛋白，然后將這一步的洗脫液加入到第二步Flag樹脂中來更進一步調取誘餌蛋白的互作蛋白。本試劑盒不僅可以調取Flag或TST單標簽融合蛋白及其互作蛋白，又可以調取Flag和TST雙標簽融合蛋白及其互作蛋白，另外相對于傳統的Flag-HA IP試劑盒，本試劑盒具有產物中不含抗體且蛋白沒有變性的優點，其產物做Western Blot檢測時不會受IgG影響，*后本試劑盒中親和材料與誘餌蛋白結合多且強，調取的互作蛋白更多。
FLAG-tag 是一段由8個氨基酸殘基組成，N-DYKDDDDK-C (1012 Da)，其作用是標記蛋白。在蛋白表達和定位研究中，可以通過基因工程技術手段將所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列連接起來，可以連接在目的蛋白的C端或N端，然后將整合后的基因轉入細胞中或胚胎干細胞亦或受精卵中。TST標簽是strep-tagⅡ（Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys）的升級版，由兩個strep-tagⅡ外加連接臂組成，與融合蛋白結合能力更強，結合位點更多，其作用是標記蛋白。在蛋白表達和定位研究中，可以通過基因工程技術手段將所要研究的目的基因和TST-tag基因序列連接起來，可以連接在目的蛋白的C端或N端，然后將整合后的基因轉入細胞中或胚胎干細胞亦或受精卵中。
流程簡述 1. 將細胞裂解液與TST樹脂，室溫下孵育 1-2 小時，或 4 ℃過夜。
2. 在室溫下，經過漂洗，洗脫得到洗脫液1。
3. 在洗脫液1中加入到Flag樹脂中，室溫孵育 2-3 小時，或 4 ℃過夜。
4. 室溫下，漂洗，加洗脫緩沖液B得到洗脫復合物。
所需額外試劑和儀器 • 磷酸鹽緩沖液（PBS，100 mM 磷酸鈉，100 mM 氯化鈉；pH 7.2）
• Flag抗體
• TST抗體
• 混勻儀 |
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