一、概述
試劑盒用于檢測豬血清或者血漿中Senecavirus A A (SVA)抗體。試劑盒原理是基于間接ELISA方法，酶標板上已經包被SVA蛋白重組抗原，添加樣品后，樣品內的抗體能與板上包被抗原特異性結合形成抗原抗體復合物，并與后面加入的酶標二抗結合，二抗上的酶再催化底物顯色，顯色深度與樣品中的抗體含量成正相關。
二、試劑盒規格及組分
〖試劑盒組分〗 〖10039-02〗〖10039-05〗〖儲存溫度〗
〖抗原包被板SVA antigen-Coated Plate〗〖2*96〗 〖5*96〗 〖4°C〗
〖陽性對照（紅蓋） Positive Control〗〖2管〗 〖5管〗 〖4°C〗
〖陰性對照（白蓋） Negative Control〗〖0.2mL〗 〖0.5mL〗 〖4°C〗
〖酶標二抗HRP-Conjugated Antibody Solution〗〖24mL〗〖58mL〗〖4°C〗
〖10X稀釋液10X Diluent Solution〗 〖12mL〗 〖28mL〗 〖4°C〗
〖檢測稀釋液 Assay Diluent〗 〖20mL〗 〖50mL〗 〖4°C〗
〖20X洗板液 20X Wash Solution〗 〖56mL〗 〖120mL〗 〖4°C〗
〖TMB底物 TMB Substrate〗 〖24mL〗 〖58mL〗 〖4°C〗
〖終止液 Stop Solution〗 〖24mL〗 〖58mL〗 〖4°C〗
備注：如果試劑盒超過一個月不使用建議陰陽性對照和酶標二抗-20°C儲存。
三、試劑以及樣品制備
1X稀釋液：用9體積的蒸餾水稀釋1體積的10X稀釋液，得到1X稀釋液。
1X洗板液：用19體積的蒸餾水稀釋1體積的20X洗板液，得到1X洗板液。
樣品血清/血漿預稀釋：在血清稀釋板上使用1X稀釋液將樣品血清稀釋10倍，例如將20uL的血清加入到180uL的1X稀釋液中混勻，備用。
陽性對照：取出回溫30分鐘后，每管加入65ul 1X稀釋液，振蕩混勻后備用，不使用時放于-20°C儲存，反復凍融應不多于3次。
四、實驗操作
〖試劑〗 〖每孔用量〗
〖檢測稀釋液〗 〖90 ul〗
〖樣品/對照〗 〖10 ul〗
〖酶標二抗〗 〖100 ul〗
〖1X洗板液〗 〖2 ml〗
〖底物〗 〖100 ul〗
〖終止液〗 〖100 ul〗
1.實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出回復室溫；
2.設置好對照及樣品在抗原包被板的位置，所有孔中加入90ul 檢測稀釋液；
3.加入10ul的陽性對照到抗原包被板兩個孔中；
4.加入10ul的陰性對照到抗原包被板的另外兩個孔中；（強烈建議將陰性和陽性對照血清分隔加入，例如左上方加陽性對照，右下方加陰性對照）
5.其他孔加入10ul預稀釋的血清樣品（已經預稀釋了1:10）.
6.輕微振蕩1分鐘；
7.封板，25°C孵育45分鐘；（注意避免陽光直射和空氣進入板中）
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