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KinExA分子－細(xì)胞相互作用系統(tǒng)

KinExA分子－細(xì)胞相互作用系統(tǒng)//KinExA分子－細(xì)胞相互作用系統(tǒng)

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公　司：上海雙墨生物科技有限公司

發(fā)布時(shí)間：2018年10月23日

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詳細(xì)說(shuō)明

一、KinExA的技術(shù)背景：

SapidyneInstruments Inc.于1995年在美國(guó)創(chuàng)立，產(chǎn)品基于獨(dú)特的Kinetic Exclusion Assay（KinExA）專利技術(shù)。在公司成立早期，Xavier大學(xué)、美國(guó)陸軍和環(huán)境保護(hù)局等研究單位采用KinExA技術(shù)開(kāi)展了大量工作；經(jīng)過(guò)數(shù)十年在生物制藥領(lǐng)域、科研領(lǐng)域及環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，KinExA技術(shù)已成為*制藥公司和生物技術(shù)公司以及許多大學(xué)、獨(dú)立研究實(shí)驗(yàn)室和環(huán)境監(jiān)測(cè)機(jī)構(gòu)研究相互作用和生物活性物質(zhì)檢測(cè)的必備工具，并且已得到FDA和EMA認(rèn)可。

三、KinExA的應(yīng)用：

應(yīng)用一、KinExA在CAR-T細(xì)胞治療中的應(yīng)用

因多種因素的限制，自體CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品可能在應(yīng)用于患者前未必能夠進(jìn)行全部項(xiàng)目的檢定，所以工藝驗(yàn)證非常重要。工藝研究及驗(yàn)證必須結(jié)合工藝的實(shí)際情況設(shè)定相應(yīng)的驗(yàn)證參數(shù)，CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品工藝研究在不斷發(fā)展，到目前為止，業(yè)界對(duì)何種工藝*并未達(dá)成共識(shí)。因此，可以在產(chǎn)品研發(fā)過(guò)程及早期臨床試驗(yàn)階段開(kāi)展不同程度的工藝驗(yàn)證研究，工藝驗(yàn)證完成后，應(yīng)在關(guān)鍵工藝步驟設(shè)置關(guān)鍵過(guò)程控制參數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)，以提高CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品的生產(chǎn)一致性。

CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制研究及檢測(cè)項(xiàng)目一般應(yīng)包括：細(xì)胞數(shù)量及其存活率、細(xì)胞表型、CAR陽(yáng)性率檢測(cè)、生物學(xué)效力檢測(cè)，無(wú)菌檢測(cè)、支原體、熱原/內(nèi)毒素的檢測(cè)、CAR-T細(xì)胞中病毒載體拷貝數(shù)及整合的檢測(cè)等。如果能夠檢測(cè)CAR-T細(xì)胞與抗原分子的親和力，以及CAR-T細(xì)胞上抗體的表達(dá)量，無(wú)疑會(huì)提升CAR-T細(xì)胞的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

目前市面上除了KinExA技術(shù)外，沒(méi)有其他特別有效的方式檢測(cè)完整細(xì)胞與分子間的親和力，更無(wú)從判斷細(xì)胞上分子的表達(dá)量。KinExA技術(shù)可以檢測(cè)細(xì)胞與分子間的親和力，并且可以計(jì)算細(xì)胞上分子的表達(dá)量。其檢測(cè)原理如下圖，先將梯度稀釋的細(xì)胞與恒定濃度的分子共同孵育達(dá)到平衡，離心之后收集上清液（此時(shí)上清液中只存在游離的分子），再通過(guò)已提前包被過(guò)的珠子捕獲游離的分子，用熒光標(biāo)簽的抗體檢測(cè)游離分子的量，通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)得到相應(yīng)的數(shù)值后，利用KinExA系統(tǒng)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

應(yīng)用二、KinExA在高親和力檢測(cè)上應(yīng)用

對(duì)于抗腫瘤藥市場(chǎng)，目前精準(zhǔn)醫(yī)療最為成熟的領(lǐng)域還是以靶向藥物為代表的抗腫瘤藥物。由于單克隆抗體類抗癌藥的副作用較小，且靶向性更好，因此，單抗藥物仍將是引領(lǐng)抗腫瘤藥物發(fā)展最為重要的領(lǐng)域。以PD-1為靶點(diǎn)的一類單抗藥呈現(xiàn)出較高的親和力，常規(guī)的相互作用檢測(cè)系統(tǒng)例如SPR 、BLI、ITC等由于自身原理的限制均不能檢測(cè)高親和力（pM級(jí)別）。KinExA技術(shù)有別于常規(guī)的相互作用檢測(cè)系統(tǒng)，能準(zhǔn)確有效的檢測(cè)高親和力（fM級(jí)別）

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