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公　司： 河南效勝實(shí)業(yè)有限公司 
發(fā)布時(shí)間：2020年04月21日
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效勝實(shí)業(yè)河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)流式檢測(cè)
本公司開展了HE染色，massson染色，PAS染色等染色，免疫組化，免疫熒光，WB .PCR.透射電鏡，掃描電鏡，細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)服務(wù)，價(jià)格優(yōu)惠，周期短；流式檢測(cè)大致分為流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞周期檢測(cè)、細(xì)胞增殖檢測(cè)、細(xì)胞因子檢測(cè)
*一、流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）：
就是對(duì)在高速流動(dòng)的鞘液包裹下的細(xì)胞、粒子進(jìn)行分析和分選的技術(shù)，這種細(xì)胞或粒子是經(jīng)過特異熒光標(biāo)記的。其特點(diǎn)是測(cè)量速度快，每秒鐘能測(cè)數(shù)千個(gè)乃至上萬個(gè)細(xì)胞，且可進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量，另一特點(diǎn)是在分析的同時(shí)可把具有指定特征的細(xì)胞分離出來，這就是分選技術(shù)。
重要參數(shù)：前向角散射（FSC）：前向角散射光的強(qiáng)度與細(xì)胞的大小有關(guān)，也就是說，同一個(gè)細(xì)胞群體，F(xiàn)SC強(qiáng)的，其細(xì)胞大一些，而FSC弱的，其細(xì)胞小一些。側(cè)向角散射（SSC）：側(cè)向角散射又稱90°散射或大角散射。側(cè)向角散射光對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感，對(duì)胞內(nèi)較大的顆粒也會(huì)有反應(yīng)。所以，側(cè)向角散射光的強(qiáng)弱可反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒的性質(zhì)。熒光信號(hào)（FL）：是細(xì)胞或細(xì)胞上的熒光染料被激光激發(fā)后發(fā)射出的熒光，不同的熒光染料其發(fā)射波長(zhǎng)不同。通過熒光強(qiáng)度可將同一個(gè)細(xì)胞群體中的有熒光標(biāo)記的細(xì)胞與無熒光標(biāo)記的細(xì)胞區(qū)分開來，也就是我們通常所說的陽(yáng)性細(xì)胞，也可以將陽(yáng)性細(xì)胞中的高FL的細(xì)胞與低FL的細(xì)胞區(qū)分開來，也就是可以把強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞和弱陽(yáng)性細(xì)胞區(qū)分開來。一般的流式細(xì)胞儀只裝有一個(gè)激光光源（488nm），可測(cè)出三個(gè)FL，即FL1、FL2、FL3。FL2-W指檢測(cè)熒光的脈沖寬度，區(qū)分單個(gè)細(xì)胞和雙聯(lián)體細(xì)胞FL2-H指脈沖高度，細(xì)胞單位面積上的熒光濃度FL2-A指脈沖面積，即細(xì)胞熒光總和
第二、細(xì)胞周期檢測(cè)：
細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨著細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化。利用PI標(biāo)記的方法，通過流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA的相對(duì)含量進(jìn)行測(cè)定，可分析細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比，反映細(xì)胞的增殖狀態(tài)和非二倍體（異倍體）的DNA含量。其中PI即碘化丙錠，可以與細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA結(jié)合，采用RNA抑制劑將RNA消化后，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)與DNA結(jié)合的PI的熒光強(qiáng)度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量的多少。
第三、細(xì)胞增殖檢測(cè)
示蹤染料標(biāo)記法：示蹤染料能與細(xì)胞發(fā)生非特異性的穩(wěn)定結(jié)合，主要有兩種結(jié)合方式：進(jìn)入胞內(nèi)與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合，如CFSE和BRSE；嵌入細(xì)胞膜的磷脂雙分子層，與細(xì)胞非公價(jià)結(jié)合，如PKH類和CellVue類等。CFSE是活細(xì)胞染料，又稱 CFDA-SE或 CFDA，其標(biāo)記細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞毒性小，被激發(fā)后能發(fā)出很強(qiáng)熒光，且非常穩(wěn)定，只有當(dāng)細(xì)胞分裂時(shí)，母細(xì)胞內(nèi)的染料會(huì)被平均分配到子細(xì)胞中，細(xì)胞的熒光信號(hào)減少一半，


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