EDTA抗凝牛血
標本要求
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保
存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心20
分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀
形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。
5.培養細胞:
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100 萬/ml 左右。
通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左
右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢
測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進
行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
EDTA抗凝牛血
人血清說明:
1、不含防腐劑;艾滋病HIV,梅毒TP、乙肝HBV、丙肝HCV,四個標本檢測均為陰性。未滅活,未除菌,不能用于臨床
2、為實驗材料,以及作為動物免疫、病理組化封閉、血清IGG制備、細胞培養、ELisa等免疫實驗中的封閉及保護劑的使用。
3、血清解凍后有濁度或少量懸浮物,為蛋白聚合體,不會影響血清的質量,如有必要用0.45um濾膜過濾。 |
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