肝素鈉抗凝兔血
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?
來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,*對(duì)不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
肝素鈉抗凝兔血
試劑及配制
1、緩沖生理鹽水:
( 1) 貯存液: Na2HPO4.12H2O 2.85g
KH2PO4 0.27g
NaCl 17.00g
蒸餾水定容至 100ml
4℃保存?zhèn)溆? ( 2)應(yīng)用液: 5ml 貯存液加 95ml 蒸餾水,再加 10%硫酸鎂 0.1ml, 當(dāng)日配制, 12 小時(shí)內(nèi)使用。
2、2%綿羊紅細(xì)胞:無菌采取綿羊血液,于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以緩沖液洗 3次,并配成 2%細(xì)胞懸液。必要時(shí)可用吸光光度法或細(xì)胞計(jì)數(shù)法使懸液細(xì)胞濃度標(biāo)準(zhǔn)化。
3、溶血素:將綿羊紅細(xì)胞溶血素(效價(jià) 1:4000),用應(yīng)用液做 1:2000 倍稀釋(即 1ml 溶血素加 1999ml 應(yīng)用液)。
4、待測血清:新鮮血液室溫放置 30min,再 4℃放置 60min,使血塊收縮, 4℃離心( 3000r/min)10min,取上清, -20℃保存。 |
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