【概述】
孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體，又名堿性綠、嚴(yán)基塊綠、孔雀綠，其既是殺真菌劑，又是染料，易溶于水，溶液呈藍(lán)綠色。長(zhǎng)期以來(lái)，漁民都用它來(lái)預(yù)防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲(chóng)病等，而且為了使鱗受損的魚延長(zhǎng)生命，在運(yùn)輸過(guò)程中和存放池內(nèi)，也常使用孔雀石綠。科研結(jié)果表明，孔雀石綠在魚內(nèi)殘留時(shí)間太長(zhǎng)，且其具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，鑒于此，許多國(guó)家均將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物。
【用途】
本試紙卡為定性檢測(cè),可用于檢測(cè)魚、蝦、以及魚池或者魚缸水樣中的孔雀石綠殘留。適于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控和大量樣本篩查。
【檢測(cè)原理】
孔雀石綠快速檢測(cè)卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理，當(dāng)試紙條插入檢測(cè)樣品溶液后，樣品溶液中的孔雀石綠與金標(biāo)抗體相結(jié)合，進(jìn)而封閉金標(biāo)抗體上孔雀石綠的抗原結(jié)合點(diǎn)，阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上孔雀石綠蛋白偶聯(lián)物結(jié)合，使T線顏色無(wú)變化;反之，如樣品溶液中沒(méi)有孔雀石綠，則不能阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上的孔雀石綠蛋白偶聯(lián)物結(jié)合，從而T線顯紅褐色。
【技術(shù)指標(biāo)】
孔雀石綠快速檢測(cè)試紙條技術(shù)指標(biāo)為水樣2ppb組織2ppb。
【樣品處理】
1. 取一定量的去脂肪組織樣本，用剪刀剪碎；
2. 稱取 2 克 勻質(zhì)樣本于 15 毫升離心管中；
3.用提取劑 1 專用滴管移取 1 毫升提取劑 1 加入到離心 管中，振蕩 30 秒鐘；將提取劑 2 加入到離心管中，振 蕩 30 秒鐘，將提取劑 3 加入到離心管中，劇烈振蕩 2 分鐘；
4. 室溫下 4000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 5 分鐘；
5. 取 3 毫升上清液于新的 5 毫升離心管中，用刻度滴管移取 2 毫升凈化劑加入到離心管中，振蕩 1 分鐘，室溫下 4000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 1 分鐘，棄去上清；
6. 用移液滴管取 2.毫升下層于 5 毫升離心管中，用刻度 滴管移取 1 毫升清潔劑加入到離心管中，振蕩 1 分 鐘，室溫下 4000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 1 分鐘；
7.棄去上層液體，用移液滴管取 1 毫升下層液體于 5ml離心管中，60℃下空氣吹干；
8. 向吹干的離心管中加入 0.3mL 復(fù)溶液，沖洗溶解試管內(nèi)壁上殘留物，吸取 100μl 溶液，待檢。
【使用步驟】
在進(jìn)行測(cè)試前先完整閱讀使用說(shuō)明書，使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫(20℃~30℃)。
1.從原包裝袋中取出試劑板，水平放置于觀察者正面， 如上圖右側(cè)所示(打開(kāi)后請(qǐng)立即使用)；
2.吸取待檢樣品溶液 100 微升于金標(biāo)微孔中，用小滴管 吹打完全溶解孔內(nèi)紅色物質(zhì)，等待反應(yīng) 5 分鐘；
3.吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔(見(jiàn)上圖)中，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)；
4. 結(jié)果應(yīng)在 8-10 分鐘讀取，其他時(shí)間判讀無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
1.陰性(－)：T 線顯色(檢測(cè)線，靠近加樣孔一端) 比C 線(對(duì)照線)深或一樣深，表示樣品中待檢藥物濃度低于檢測(cè)限或不含待檢藥物。
2. 陽(yáng)性(＋)： T 線顯色比 C 線淺，或 T 線無(wú)顯色，表示樣品中待檢藥物濃度高于檢測(cè)限，T 線顯色比 C線越淺，表示樣品中待檢藥物濃度越高。
3.無(wú)效：未出現(xiàn) C 線，可能是操作不當(dāng)或試劑板已失 效。應(yīng)再次閱讀說(shuō)明書，并用新的試劑板重新測(cè)試。 |
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