泰特儀器教你如何讀懂色譜圖
色譜圖是指樣品流經色譜柱和氣相色譜儀GC2030檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elution profile)。色譜圖是指被分離組分的檢測信號隨時間分布的圖象。色譜圖形狀隨色譜方法和檢測記錄的方式不同而不同,迎頭色譜和頂替色譜的色譜圖為一系列臺階;在洗脫法色譜中,若采用微分型檢測器時,分離組分的檢測信號隨時間變化的圖形為近似于高斯分布的一組色譜峰群,色譜圖的縱坐標為檢測器的響應信號,橫坐標為時間、體積或距離。泰特儀器GC2030教您如何讀懂色譜圖。
色譜峰(peak):組分流經檢測器時響應的連續信號產生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對稱形正態分布曲線(高斯Gauss曲線)。不對稱色譜峰有兩種:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少見。
基線(base line):經流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應平行于時間軸。色譜儀器運行時,由于檢測條件的變化,會引起的信號線的位置發生變化,稱為基線漂移。
噪音(noise):基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
漂移(drift):基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩定所引起,柱內的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產生漂移。
拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色譜峰的對稱性,也稱為對稱因子或不對稱因子。《中國藥典》規定T應為0.95~1.05。T<0.95為前延峰,T>1.05為拖尾峰。
峰底:基線上峰的起點至終點的距離。
峰高(peak height,h):峰的*高點至峰底的距離。
峰寬(peak width,W):峰兩側拐點處所作兩條切線與基線的兩個交點間的距離。W=4σ
半峰寬(peak width at half-height,Wh/2):峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ
標準偏差(standard deviation,σ):正態分布曲線x=±1時(拐點)的峰寬之半。正常峰的拐點在峰高的0.607倍處。標準偏差的大小說明組分在流出色譜柱過程中的分散程度。σ小,分散程度小、極點濃度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。
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