應(yīng)用1:蛋白質(zhì)-抗體相互作用
1.1 介紹
免疫檢測通常用于檢測臨床研究、診斷試驗和學(xué)術(shù)研究等領(lǐng)域生化標(biāo)志物的存在和水平。目前有很多免疫檢測法,但它們都依賴于抗體與其靶蛋白的特異性結(jié)合作用。抗體-蛋白結(jié)合動力學(xué)和強(qiáng)度攜帶著系統(tǒng)的特有信息,這些關(guān)鍵信息可以通過SPR的免疫檢測格式收集。
SPR是一種強(qiáng)大的分析技術(shù),可以快速地進(jìn)行蛋白質(zhì)組研究和藥物發(fā)現(xiàn),但它的高成本和復(fù)雜性限制了其在學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)中的應(yīng)用。
1.2 Affinité P4 SPR
Affinité P4 SPR通過使用簡單、低成本和易于操作的設(shè)備使得該技術(shù)能夠推廣開來,并且降低了SPR的應(yīng)用障礙。
緊湊型P4 SPR(占地面積相當(dāng)于一本書)可以輕松地安裝在實驗臺上,并在幾分鐘內(nèi)由任何人(本科生到宇航員,高級化學(xué)家到業(yè)余科學(xué)家)操作。此款P4 SPR的強(qiáng)大設(shè)計提供給我們從幾分鐘到幾小時獨特且靈活的檢測時間,以此適應(yīng)廣泛的生物分子相互作用動力學(xué)。
2.1 介紹
DNA、RNA和PNA等核酸可以采用同蛋白質(zhì)活性位點相結(jié)合的活性結(jié)構(gòu)。與蛋白質(zhì)-抗體結(jié)合類似,蛋白質(zhì)-核酸(NA)的結(jié)合也能夠表現(xiàn)出不同的親和力,而這種親和力可以通過改變NA序列來調(diào)節(jié)。設(shè)計一個NA序列,從而達(dá)到與靶蛋白的特異親和力范圍,這種篩選策略被應(yīng)用于個性化醫(yī)療等新興領(lǐng)域。SPR是一種強(qiáng)大的無標(biāo)記技術(shù),能夠提供蛋白質(zhì)-NA結(jié)合動力學(xué)數(shù)據(jù),從而應(yīng)用于了解和調(diào)節(jié)核心細(xì)胞過程(如轉(zhuǎn)錄調(diào)控)的學(xué)術(shù)和臨床研究。
2.2 Affinité P4 SPR
Affinité的P4 SPR具有一種獨特的方法,用來鑒定DNA上的結(jié)合配偶體,定量靶蛋白,并確定結(jié)合親和力和結(jié)合動力學(xué)。簡單的NA固定技術(shù)和易于操作的儀器設(shè)備,令上述方法能夠讓任何人(本科生到宇航員,高級化學(xué)家到業(yè)余科學(xué)家)在短短幾分鐘的培訓(xùn)時間里輕松領(lǐng)悟。
Affinité技術(shù)已經(jīng)實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)-DNA相互作用的成功測定。在該項測試中,雙鏈DNA片段被雜交在SPR芯片上。我們通過一種無標(biāo)記方法檢測到DNA與可溶性蛋白質(zhì)之間的相互作用,該方法適用于任何巰基修飾的核酸鏈的檢測。
2.3 Lacl 阻遏蛋白/雙鏈DNA
3.jpg
利用雙鏈DNA分步感測蛋白質(zhì)
關(guān)鍵的實驗步驟
Affinité的肽SPR芯片
巰基修飾的寡核苷酸
PBS 1×pH 7.4緩沖液
應(yīng)用3:藥物-受體相互作用
3.1 介紹
小型治療藥物(500-1000Da)是一種可能有助于調(diào)節(jié)生物過程的化合物,而且大部分治療藥物都屬于這一類。表征小型治療藥物與其受體之間的相互作用是非 |
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