應用1:蛋白質-抗體相互作用
1.1 介紹
免疫檢測通常用于檢測臨床研究、診斷試驗和學術研究等領域生化標志物的存在和水平。目前有很多免疫檢測法,但它們都依賴于抗體與其靶蛋白的特異性結合作用。抗體-蛋白結合動力學和強度攜帶著系統的特有信息,這些關鍵信息可以通過SPR的免疫檢測格式收集。
SPR是一種強大的分析技術,可以快速地進行蛋白質組研究和藥物發現,但它的高成本和復雜性限制了其在學術機構中的應用。
1.2 Affinité P4 SPR
Affinité P4 SPR通過使用簡單、低成本和易于操作的設備使得該技術能夠推廣開來,并且降低了SPR的應用障礙。
緊湊型P4 SPR(占地面積相當于一本書)可以輕松地安裝在實驗臺上,并在幾分鐘內由任何人(本科生到宇航員,高級化學家到業余科學家)操作。此款P4 SPR的強大設計提供給我們從幾分鐘到幾小時獨特且靈活的檢測時間,以此適應廣泛的生物分子相互作用動力學。
2.1 介紹
DNA、RNA和PNA等核酸可以采用同蛋白質活性位點相結合的活性結構。與蛋白質-抗體結合類似,蛋白質-核酸(NA)的結合也能夠表現出不同的親和力,而這種親和力可以通過改變NA序列來調節。設計一個NA序列,從而達到與靶蛋白的特異親和力范圍,這種篩選策略被應用于個性化醫療等新興領域。SPR是一種強大的無標記技術,能夠提供蛋白質-NA結合動力學數據,從而應用于了解和調節核心細胞過程(如轉錄調控)的學術和臨床研究。
2.2 Affinité P4 SPR
Affinité的P4 SPR具有一種獨特的方法,用來鑒定DNA上的結合配偶體,定量靶蛋白,并確定結合親和力和結合動力學。簡單的NA固定技術和易于操作的儀器設備,令上述方法能夠讓任何人(本科生到宇航員,高級化學家到業余科學家)在短短幾分鐘的培訓時間里輕松領悟。
Affinité技術已經實現了對蛋白質-DNA相互作用的成功測定。在該項測試中,雙鏈DNA片段被雜交在SPR芯片上。我們通過一種無標記方法檢測到DNA與可溶性蛋白質之間的相互作用,該方法適用于任何巰基修飾的核酸鏈的檢測。
2.3 Lacl 阻遏蛋白/雙鏈DNA
3.jpg
利用雙鏈DNA分步感測蛋白質
關鍵的實驗步驟
Affinité的肽SPR芯片
巰基修飾的寡核苷酸
PBS 1×pH 7.4緩沖液
應用3:藥物-受體相互作用
3.1 介紹
小型治療藥物(500-1000Da)是一種可能有助于調節生物過程的化合物,而且大部分治療藥物都屬于這一類。表征小型治療藥物與其受體之間的相互作用是非 |
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